Magnetiese Universele Virale DNS/RNA-stel HYD521
Die Magnetiese Universele Virale DNS/RNA-stel is geskik vir die ekstraksie van virale nukleïensuur uit volbloed of selvrye liggaamsvloeistowwe (soos serum, plasma, serebrospinale vloeistof, neus-/faringeale deppers, alveolêre spoelvloeistof, ens.). Hierdie metode gebruik magnetiese kraalsuiweringstegnologie, en geen giftige fenolchloroform-ekstraksie is nodig tydens die ekstraksieproses nie. Dit is veilig, nie-giftig en vinnig. Die verkrygde produk kan direk gebruik word in PCR, qPCR, tweedegenerasie-volgordebepaling en ander eksperimente. Wanneer dit gebruik word met outomatiese ekstraksie-instrumente met magnetiese krale, kan hoë-deurset-ekstraksie van nukleïensure bereik word.
Produkinligting
| Komponente | 48T |
| Lise en Bindingsoplossing | 33 ml |
| Magnetiese kraalsuspensie | 1.1 ml |
| Wasbuffer A | 40 ml |
| Wasbuffer B | 80 ml |
| Elueringsoplossing | 10 ml |
| Proteïnase K | 1.1 ml |
Bergingstoestande
Proteinase K moet by 2~8℃ gestoor word en die ander bestanddele moet by kamertemperatuur gestoor word. Die rakleeftyd is 18 maande.
Voorbeeldbeskrywing
1. Toepaslike monstertipes: volbloed, serum, plasma, serebrospinale vloeistof, neus-/faringeale deppers, alveolêre spoelvloeistof en ander monsters.
2. Monsterberging en -vervoer: Monsters kan onmiddellik vir toetsing gebruik word of by -70 ℃ of laer vir toetsing gestoor word. Die bergingstydperk is 6 maande. Herhaalde vries en ontdooiing moet vermy word. Monsters word per koue ketting vervoer.
3. Vries-ontdooi vereistes: Vinnige vries en ontdooi, vermy herhaalde vries en ontdooi.
Operasie
Voor die eksperiment, kyk of die oplossing neerslag het en of die magnetiese krale hersuspendeer kan word.
1. Plaas 200~300 μL monster oor na 'n 1.5 mL sentrifugebuis, voeg 600 μL Lise- en Bindingsoplossing, 20 μL Proteinase K, en 20 μL magnetiese kraalsuspensie in volgorde by en vortex teen hoë spoed vir 30 sekondes. Inkubeer by 50℃ vir 5~7 minute. Indien die termostaat nie 'n ossillasiefunksie het nie, vortex 3 keer gedurende die inkubasietydperk, elke keer vir 15 sekondes.
2. Plaas oor na 'n 1.5 mL magnetiese staander vir magnetiese skeiding totdat die oplossing helder en deursigtig is, en gooi die oplossing weg.
3. Voeg 700 μL wasbuffer A by, vortex vir 10 sekondes om die magnetiese krale op te breek, en plaas dan oor na 'n magnetiese staander vir magnetiese skeiding totdat die oplossing helder is, en gooi die oplossing weg.
4. Voeg 700 μL wasbuffer B by, vortex vir 10 s om die magnetiese krale op te breek, plaas dit oor na 'n magnetiese staander vir magnetiese skeiding totdat die oplossing helder is, en gooi die oplossing weg.
5. Voeg weer 700 μL wasbuffer B by, vortex vir 10 s om die magnetiese krale op te breek, plaas dit oor na 'n magnetiese staander vir magnetiese skeiding totdat die oplossing helder is, en gooi die oplossing weg.
6. Sentrifugeer kortliks om druppels op die buiswand te versamel, plaas dit oor na 'n magnetiese staander vir verheldering en absorbeer die oorblywende vloeistof. Laat dit vir 3-5 min. lugdroog word.
Let wel: Etanolresidu sal daaropvolgende ensiemreaksies inhibeer, maak dus seker dat die etanol heeltemal verdamp tydens droging. Moenie te lank droog word om te verhoed dat die daaropvolgende elueringseffek beïnvloed word nie.
7. Voeg 40~100 μL van die elueringsoplossing by, vortex teen hoë spoed vir 2~3 minute om die magnetiese krale op te breek. Inkubeer by 60℃ vir 5 minute, en vortex dan teen hoë spoed vir 60 sekondes.
8. Sentrifugeer onmiddellik om die vloeistof van die buisdop te versamel en dit na die magnetiese rak oor te dra totdat die magnetiese krale heeltemal geadsorbeer is. Dra dan die vloeistof versigtig oor na 'n nuwe sentrifugebuis om die nukleïensuuroplossing te verkry.
9. Die nukleïensuuroplossing kan by -20°C vir korttermynberging en -80°C vir langtermynberging gestoor word.
Notas
1. Die verskeie buffers in hierdie stel bevat guanidien soute. Vir u veiligheid en gesondheid, dra asseblief 'n laboratoriumjas en weggooibare handskoene. En hanteer volgens veiligheidsmaatreëls. Moenie dat die buffer in aanraking kom met die vel, oë en slymvliese nie. Indien dit wel gebeur, was onmiddellik met baie water en soek mediese hulp.
2. Indien die oplossing neerslaan, moet dit in 30℃ water gebad word totdat die neerslag heeltemal opgelos is voor gebruik.
3. Indien die magnetiese kraalsuspensie gevries is, moenie dit gebruik nie.
4. Die verskeie buffers in hierdie stel bevat guanidien soute. Moenie oksiderende ontsmettingsmiddels soos natriumhipochloriet gebruik om hulle te behandel nie, anders sal giftige gasse vrygestel word en hulle moet as mediese afval behandel word.
5. Daar mag dalk oorblywende magnetiese krale tydens eluering wees. Probeer om die inaseming van magnetiese krale te vermy wanneer monsters geaspireer word.