مجموعة الحمض النووي الفيروسي/الرنا المغناطيسية العالمية HYD521
تُعدّ مجموعة استخلاص الحمض النووي الفيروسي العالمي المغناطيسي (DNA/RNA) مناسبة لاستخلاص الحمض النووي الفيروسي من الدم الكامل أو سوائل الجسم الخالية من الخلايا (مثل المصل، والبلازما، والسائل النخاعي، ومسحات الأنف/البلعوم، وسائل غسل الحويصلات الهوائية، وغيرها). تعتمد هذه الطريقة على تقنية التنقية بالخرز المغناطيسي، ولا تتطلب استخدام الفينول والكلوروفورم السام أثناء عملية الاستخلاص. إنها طريقة آمنة وغير سامة وسريعة. يمكن استخدام المنتج المُستخلص مباشرةً في تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، وتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR)، وتسلسل الجيل الثاني، وغيرها من التجارب. عند استخدامها مع أجهزة الاستخلاص الآلية بالخرز المغناطيسي، يُمكن تحقيق استخلاص عالي الإنتاجية للأحماض النووية.
معلومات المنتج
| عناصر | 48T |
| محلول التحلل والربط | 33 مل |
| تعليق الخرز المغناطيسي | 1.1 مل |
| محلول الغسيل أ | 40 مل |
| محلول الغسيل B | 80 مل |
| محلول الإذابة | 10 مل |
| بروتينيز ك | 1.1 مل |
شروط التخزين
يُحفظ بروتينيز ك في درجة حرارة تتراوح بين 2 و8 درجات مئوية، بينما تُحفظ المكونات الأخرى في درجة حرارة الغرفة. مدة الصلاحية 18 شهرًا.
وصف العينة
1. أنواع العينات القابلة للتطبيق: الدم الكامل، المصل، البلازما، السائل النخاعي، مسحات الأنف/البلعوم، سائل غسل الحويصلات الهوائية وعينات أخرى.
٢. تخزين العينات ونقلها: يمكن استخدام العينات للاختبار فورًا أو تخزينها عند درجة حرارة -٧٠ درجة مئوية أو أقل لإجراء الاختبار. مدة التخزين ستة أشهر. يجب تجنب التجميد والذوبان المتكررين. تُنقل العينات عبر سلسلة التبريد.
3. متطلبات التجميد والذوبان: التجميد والذوبان السريع، تجنب التجميد والذوبان المتكرر.
عملية
قبل التجربة، تحقق مما إذا كان المحلول يحتوي على رواسب وما إذا كان من الممكن إعادة تعليق الخرز المغناطيسي.
١. انقل ٢٠٠-٣٠٠ ميكرولتر من العينة إلى أنبوب طرد مركزي سعة ١.٥ مل، ثم أضف ٦٠٠ ميكرولتر من محلول التحلل والربط، و٢٠ ميكرولتر من بروتينيز K، و٢٠ ميكرولتر من معلق الخرز المغناطيسي بالتتابع، ثم رجّ الأنبوب بسرعة عالية لمدة ٣٠ ثانية. حضّن الأنبوب عند درجة حرارة ٥٠ درجة مئوية لمدة ٥-٧ دقائق. إذا لم يكن منظم الحرارة مزودًا بوظيفة التذبذب، رجّ الأنبوب ٣ مرات خلال فترة التحضين، كل مرة لمدة ١٥ ثانية.
2. انقل المحلول إلى حامل مغناطيسي سعة 1.5 مل للفصل المغناطيسي حتى يصبح المحلول صافيًا وشفافًا، ثم تخلص من المحلول.
3. أضف 700 ميكرولتر من محلول الغسيل A، وقم بالتقليب لمدة 10 ثوانٍ لتفكيك الخرز المغناطيسي، ثم انقله إلى حامل مغناطيسي للفصل المغناطيسي حتى يصبح المحلول صافيًا، وتخلص من المحلول.
4. أضف 700 ميكرولتر من محلول الغسيل B، وقم بالتقليب لمدة 10 ثوانٍ لتفكيك الخرز المغناطيسي، ثم انقله إلى حامل مغناطيسي للفصل المغناطيسي حتى يصبح المحلول صافيًا، وتخلص من المحلول.
5. أضف 700 ميكرولتر من محلول الغسيل B مرة أخرى، وقم بالتقليب لمدة 10 ثوانٍ لتفكيك الخرز المغناطيسي، ثم انقله إلى حامل مغناطيسي للفصل المغناطيسي حتى يصبح المحلول صافيًا، وتخلص من المحلول.
6. قم بالطرد المركزي لفترة وجيزة لجمع القطرات على جدار الأنبوب، ثم انقلها إلى حامل مغناطيسي للتصفية، وامتص السائل المتبقي. اتركها تجف في الهواء لمدة 3-5 دقائق.
ملاحظة: ستؤدي بقايا الإيثانول إلى تثبيط التفاعلات الإنزيمية اللاحقة، لذا تأكد من تبخر الإيثانول تمامًا أثناء التجفيف. لا تتركه يجف لفترة طويلة جدًا لتجنب التأثير على فعالية الاستخلاص اللاحقة.
7. أضف 40-100 ميكرولتر من محلول الإذابة، ثم قم بالرجّ بسرعة عالية لمدة 2-3 دقائق لتفتيت الخرز المغناطيسي. حضّن المزيج عند درجة حرارة 60 درجة مئوية لمدة 5 دقائق، ثم قم بالرجّ بسرعة عالية لمدة 60 ثانية.
٨. استخدم جهاز الطرد المركزي الفوري لجمع السائل من غطاء الأنبوب ونقله إلى الحامل المغناطيسي حتى يتم امتصاص الخرز المغناطيسي بالكامل. ثم انقل السائل بحرص إلى أنبوب طرد مركزي جديد للحصول على محلول الحمض النووي.
9. يمكن تخزين محلول الحمض النووي عند درجة حرارة -20 درجة مئوية للتخزين قصير المدى وعند درجة حرارة -80 درجة مئوية للتخزين طويل المدى.
ملحوظات
١. تحتوي المحاليل المنظمة المختلفة في هذه المجموعة على أملاح الغوانيدين. حفاظًا على سلامتك وصحتك، يُرجى ارتداء معطف المختبر وقفازات يمكن التخلص منها. والتعامل معها وفقًا لاحتياطات السلامة القياسية. تجنب ملامسة المحلول المنظم للجلد أو العينين أو الأغشية المخاطية. في حال حدوث ذلك، يُرجى غسل المنطقة فورًا بكمية وفيرة من الماء واستشارة الطبيب.
2. إذا ترسب المحلول، فيجب غمره في ماء بدرجة حرارة 30 درجة مئوية حتى يذوب الراسب تمامًا قبل الاستخدام.
3. إذا كان معلق الخرز المغناطيسي متجمداً، فلا تستخدمه.
٤. تحتوي المحاليل المنظمة المختلفة في هذه المجموعة على أملاح الغوانيدين. لا تستخدم المطهرات المؤكسدة مثل هيبوكلوريت الصوديوم لمعالجتها، وإلا ستنطلق غازات سامة ويجب التعامل معها كنفايات طبية.
5. قد تبقى بعض الخرزات المغناطيسية أثناء عملية الاستخلاص. حاول تجنب استنشاق الخرزات المغناطيسية عند سحب العينات.


