Maqnetik Universal Viral DNT/RNT Dəsti HYD521
Maqnit Universal Viral DNT/RNT Dəsti, bütün qandan və ya hüceyrəsiz bədən mayelərindən (məsələn, serum, plazma, onurğa beyni mayesi, burun/udlaq tamponları, alveolyar lavaj mayesi və s.) virus nuklein turşusunu çıxarmaq üçün uyğundur. Bu üsul maqnit muncuq təmizləmə texnologiyasından istifadə edir və ekstraksiya prosesi zamanı zəhərli fenol xloroform ekstraksiyası tələb olunmur. Təhlükəsiz, toksik olmayan və sürətlidir. Əldə edilən məhsul birbaşa PCR, qPCR, ikinci nəsil ardıcıllıqla və digər təcrübələrdə istifadə edilə bilər. Maqnit muncuq avtomatlaşdırılmış ekstraksiya alətləri ilə istifadə edildikdə, nuklein turşularının yüksək məhsuldarlıqla ekstraksiyasına nail olmaq mümkündür.
Məhsul haqqında məlumat
| Komponentlər | 48T |
| Lizis və Bağlayıcı Məhlul | 33 ml |
| Maqnit muncuq asqısı | 1.1 ml |
| Yuyucu bufer A | 40 ml |
| Yuyucu bufer B | 80 ml |
| Elusiya məhlulu | 10 ml |
| Proteinaz K | 1.1 ml |
Saxlama şərtləri
Proteinaz K 2-8°C temperaturda, digər inqrediyentlər isə otaq temperaturunda saxlanılmalıdır. Raf ömrü 18 aydır.
Nümunə Təsviri
1. Uyğun nümunə növləri: tam qan, serum, plazma, onurğa beyni mayesi, burun/udlaq tamponları, alveolyar lavaj mayesi və digər nümunələr.
2. Nümunələrin saxlanması və daşınması: Nümunələr dərhal sınaq üçün istifadə edilə bilər və ya sınaq üçün -70℃ və ya daha aşağı temperaturda saxlanıla bilər. Saxlama müddəti 6 aydır. Təkrar dondurulma və əridilmənin qarşısı alınmalıdır. Nümunələr soyuq zəncir vasitəsilə daşınır.
3. Dondurma-ərimə tələbləri: Tez dondurma və ərimə, təkrar dondurma və ərimədən çəkinin.
Əməliyyat
Təcrübədən əvvəl, məhlulun çöküntüyə malik olub olmadığını və maqnit muncuqlarının yenidən asılıb-asıla bilməyəcəyini yoxlayın.
1. 200-300 μL nümunəni 1,5 ml-lik santrifüj borusuna köçürün, ardıcıl olaraq 600 μL Lizis və Bağlayıcı Məhlul, 20 μL Proteinaz K və 20 μL maqnit muncuq suspenziyası əlavə edin və yüksək sürətlə 30 saniyə vorteks edin. 50℃-də 5-7 dəqiqə inkubasiya edin. Termostatın salınma funksiyası yoxdursa, inkubasiya dövründə 3 dəfə, hər dəfə 15 saniyə vorteks edin.
2. Məhlul şəffaf və şəffaf olana qədər maqnit ayırma üçün 1,5 ml-lik maqnit dayağına köçürün və məhlulu atın.
3. 700 μL yuma buferi A əlavə edin, maqnit muncuqlarını parçalamaq üçün 10 saniyə qarışdırın və sonra məhlul şəffaflaşana qədər maqnit ayırma üçün maqnit dayağına köçürün və məhlulu atın.
4. 700 μL yuma buferi B əlavə edin, maqnit muncuqlarını parçalamaq üçün 10 saniyə buxarlayın, məhlul şəffaflaşana qədər maqnit ayırma üçün maqnit dayağına köçürün və məhlulu atın.
5. Yenidən 700 μL yuma buferi B əlavə edin, maqnit muncuqlarını parçalamaq üçün 10 saniyə qarışdırın, məhlul şəffaflaşana qədər maqnit ayırma üçün maqnit dayağına köçürün və məhlulu atın.
6. Borunun divarındakı damcıları toplamaq üçün qısa müddətə santrifüj edin, aydınlaşdırmaq üçün maqnit dayağına köçürün və qalıq mayeni udun. 3-5 dəqiqə havada qurudun.
Qeyd: Etanol qalığı sonrakı ferment reaksiyalarını maneə törədəcək, ona görə də qurudarkən etanolun tamamilə buxarlandığından əmin olun. Sonrakı elusiya effektinə təsir etməmək üçün çox uzun müddət qurutmayın.
7. 40-100 μL Elusiya məhlulu əlavə edin, maqnit muncuqlarını parçalamaq üçün yüksək sürətlə 2-3 dəqiqə vorteks edin. 60℃-də 5 dəqiqə inkubasiya edin, sonra yüksək sürətlə 60 saniyə vorteks edin.
8. Maqnit muncuqları tamamilə adsorbsiya olunana qədər mayeni boru qapağından toplamaq və maqnit rəfinə köçürmək üçün dərhal santrifüj edin. Daha sonra nuklein turşusu məhlulunu əldə etmək üçün mayeni ehtiyatla yeni bir santrifüj borusuna köçürün.
9. Nuklein turşusu məhlulu qısamüddətli saxlama üçün -20°C, uzunmüddətli saxlama üçün isə -80°C temperaturda saxlanıla bilər.
Qeydlər
1. Bu dəstdəki müxtəlif buferlərdə quanidin duzları var. Təhlükəsizliyiniz və sağlamlığınız üçün xahiş edirik laboratoriya xalat və birdəfəlik əlcək geyin. Təhlükəsizlik standartlarına uyğun olaraq istifadə edin. Buferin dəriyə, gözlərə və selikli qişalara təmas etməsinə icazə verməyin. Əgər bu baş verərsə, dərhal bol su ilə yuyun və tibbi yardım alın.
2. Əgər məhlul çökərsə, istifadə etməzdən əvvəl çöküntü tamamilə həll olana qədər 30°C suda çimdirilməlidir.
3. Maqnit muncuq asqısı donubsa, istifadə etməyin.
4. Bu dəstdəki müxtəlif buferlər quanidin duzları ehtiva edir. Onları emal etmək üçün natrium hipoxlorit kimi oksidləşdirici dezinfeksiyaedici maddələrdən istifadə etməyin, əks halda zəhərli qazlar ayrılacaq və onlar tibbi tullantı kimi emal olunmalıdır.
5. Elüsiya zamanı qalıq maqnit muncuqları qala bilər. Nümunələri sorularkən maqnit muncuqlarını nəfəs almaqdan çəkinin.