2× ПЦР-прэмікс (з фарбавальнікам) HYA442
2× ПЦР-галоўная сумесь змяшчае Taq ДНК-палімеразу, dNTP і іншыя кампаненты, неабходныя для ПЦР. Галоўная сумесь стабільная на працягу 3 месяцаў пры тэмпературы 4℃ з нашымі індывідуальнымі стабілізатарамі. Раствор папярэдняй сумесі аптымізаваны для звычайнай ПЦР і гатовы да выкарыстання пасля дадання ДНК-матрыцы і праймераў. Прадукты ПЦР можна загружаць непасрэдна для электрафарэзу з папярэдне загружаным фарбавальнікам бромфенол сінім. Ампліфікаваныя прадукты ўтрымліваюць выступ 3'-dA і могуць быць лёгка кланаваны ў Т-вектар. 2× ПЦР-галоўная сумесь спрашчае працэдуру ПЦР і памяншае забруджванне.
Кампаненты
| Кампаненты | Памер-1 | Памер-2 | Памер-3 |
| 2× ПЦР-прэмікс (з фарбавальнікам) | 5 мл | 1 мл × 15 | 1 мл × 50 |
Захоўванне
Захоўваць пры тэмпературы -20°C на працягу 2 гадоў.
Інструкцыі
1. Сістэма рэакцый
| Кампаненты | Аб'ём |
| 2× ПЦР-прэмікс (з фарбавальнікам) | 25 мкл |
| Праймер для нанясення на глебу (10 мкМ) | 2 мкл |
| Зваротны праймер (10 мкМ) | 2 мкл |
| Шаблон ДНК* | Зменная |
| ддХ2THE | Да 50 мкл |
*Выкарыстанне шаблону: 50-200 нг геномнай ДНК; 0,1-10 нг плазмидной ДНК
2. Праграма рэакцыі
| Крок | Тэмпература | Час | Цыклы |
| Пачатковая дэнатурацыя | 94 ℃ | 5 хвілін | 1 |
| Дэнатурацыя | 94 ℃ | 30 с | 35 |
| Адпал | 50-60 ℃ | 30 с | |
| Пашырэнне | 72 ℃ | 30-60 сек/кб | |
| Фінальнае падаўжэнне | 72 ℃ | 10 хвілін | 1 |
| Трымаць | 4 ℃ | - | 1 |
1. Мг2+ канцэнтрацыя: Гэты прадукт змяшчае 3 мМ MgCl2, падыходзіць для большасці ПЦР-рэакцый.
2. Тэмпература адпалу: Калі ласка, звярніцеся да тэарэтычнага значэння Tm грунтовак. Тэмпературу адпалу можна ўсталяваць на 2-5℃ ніжэй за тэарэтычнае значэнне грунтоўкі.
3. Час падаўжэння: для малекулярнай ідэнтыфікацыі рэкамендуецца 30 сек/кб. Для кланавання генаў рэкамендуецца 60 сек/кб.
Заўвагі
1. ПЦР-прадукты з 2× PCR Master Mix не падыходзяць для электрафарэзу ў поліакрыламідным гелі.
2. Дзеля вашай бяспекі і здароўя, калі ласка, апранайце лабараторныя халаты і аднаразовыя пальчаткі падчас працы.
3. Выкарыстоўваецца ТОЛЬКІ ў даследчых мэтах!