Універсальны магнітны набор для аналізу віруснай ДНК/РНК HYD521
Універсальны магнітны набор для вызначэння віруснай ДНК/РНК падыходзіць для экстракцыі віруснай нуклеінавай кіслаты з цэльнай крыві або бясклетачных біялагічных вадкасцей (такіх як сыроватка, плазма, спіннамазгавая вадкасць, мазкі з носа/глоткі, альвеалярная лаважная вадкасць і г.д.). Гэты метад выкарыстоўвае тэхналогію ачысткі магнітнымі шарыкамі, і падчас працэсу экстракцыі не патрабуецца экстракцыя таксічным фенол-хлараформам. Ён бяспечны, нетаксічны і хуткі. Атрыманы прадукт можна непасрэдна выкарыстоўваць у ПЦР, кПЦР, секвенаванні другога пакалення і іншых эксперыментах. Пры выкарыстанні з аўтаматызаванымі прыборамі для экстракцыі з магнітнымі шарыкамі можна дасягнуць высокапрадукцыйнай экстракцыі нуклеінавых кіслот.
Інфармацыя пра прадукт
| Кампаненты | 48Т |
| Лізіс і звязальны раствор | 33 мл |
| Магнітная падвеска з шарыкаў | 1,1 мл |
| Прамывальны буфер А | 40 мл |
| Прамывальны буфер B | 80 мл |
| Раствор для элюцыі | 10 мл |
| Пратэіназа К | 1,1 мл |
Умовы захоўвання
Пратэіназу К варта захоўваць пры тэмпературы 2~8℃, а іншыя інгрэдыенты — пры пакаёвай тэмпературы. Тэрмін прыдатнасці — 18 месяцаў.
Прыклад апісання
1. Прыдатныя тыпы ўзораў: цэльная кроў, сыроватка, плазма, спіннамазгавая вадкасць, мазкі з носа/глоткі, вадкасць для альвеалярнага лаважу і іншыя ўзоры.
2. Захоўванне і транспарціроўка ўзораў: Узоры можна выкарыстоўваць для тэставання адразу або захоўваць пры тэмпературы -70℃ або ніжэй. Тэрмін захоўвання складае 6 месяцаў. Варта пазбягаць паўторнага замарожвання і размарожвання. Узоры транспартуюцца па халадзільным ланцугу.
3. Патрабаванні да замарожвання і размарожвання: Хуткае замарожванне і размарожванне, пазбягайце паўторнага замарожвання і размарожвання.
Аперацыя
Перад эксперыментам праверце, ці ў растворы выпалі асадкі і ці можна рэсуспендаваць магнітныя шарыкі.
1. Перанясіце 200~300 мкл узору ў цэнтрыфужную прабірку аб'ёмам 1,5 мл, дадайце паслядоўна 600 мкл раствора для лізісу і звязвання, 20 мкл пратэіназы К і 20 мкл суспензіі магнітных шарыкаў і перамешвайце на высокай хуткасці на працягу 30 секунд. Інкубуйце пры тэмпературы 50℃ на працягу 5~7 хвілін. Калі тэрмастат не мае функцыі ваганняў, перамешвайце на віхравой палачцы 3 разы на працягу інкубацыі, кожны раз па 15 секунд.
2. Перанясіце ў магнітны штатыў аб'ёмам 1,5 мл для магнітнага падзелу, пакуль раствор не стане празрыстым, і выкіньце раствор.
3. Дадайце 700 мкл прамыўнога буфера А, змяшайце на віхравой ванне на працягу 10 секунд, каб разбурыць магнітныя шарыкі, а затым перанясіце на магнітны штатыў для магнітнага падзелу, пакуль раствор не стане празрыстым, і выкіньце раствор.
4. Дадайце 700 мкл прамыўнога буфера B, змяшайце на віхравой стужцы на працягу 10 секунд, каб разбурыць магнітныя шарыкі, перанясіце на магнітны штатыў для магнітнага падзелу, пакуль раствор не стане празрыстым, і выкіньце раствор.
5. Зноў дадайце 700 мкл прамыўнога буфера B, змяшайце на віхравой стужцы на працягу 10 секунд, каб разбурыць магнітныя шарыкі, перанясіце на магнітны штатыў для магнітнага падзелу, пакуль раствор не стане празрыстым, і выкіньце раствор.
6. Кароткачасова адцэнтрыфугуйце, каб сабраць кроплі на сценках прабіркі, перанясіце на магнітны штатыў для асвятлення і паглыніце рэшткі вадкасці. Высушыце на паветры на працягу 3-5 хвілін.
Заўвага: Рэшткі этанолу будуць інгібіраваць наступныя ферментатыўныя рэакцыі, таму пераканайцеся, што этанол цалкам выпараецца падчас высушвання. Не сушыце занадта доўга, каб не паўплываць на наступны эфект элюцыі.
7. Дадайце 40~100 мкл раствора для элюцыі, змяшайце на высокай хуткасці на працягу 2~3 хвілін, каб разбурыць магнітныя шарыкі. Інкубуйце пры тэмпературы 60℃ на працягу 5 хвілін, затым змяшайце на высокай хуткасці на працягу 60 секунд.
8. Імгненна адцэнтрыфугуйце, каб сабраць вадкасць з вечка прабіркі і перанесці яе на магнітны штатыў, пакуль магнітныя шарыкі цалкам не адсарбуюцца. Затым асцярожна перанесці вадкасць у новую цэнтрыфужную прабірку, каб атрымаць раствор нуклеінавай кіслаты.
9. Раствор нуклеінавай кіслаты можна захоўваць пры тэмпературы -20°C для кароткатэрміновага захоўвання і -80°C для доўгатэрміновага захоўвання.
Заўвагі
1. Розныя буферы ў гэтым наборы ўтрымліваюць солі гуанідыну. Дзеля вашай бяспекі і здароўя, калі ласка, апранайце лабараторны халат і аднаразовыя пальчаткі. І працуйце ў адпаведнасці са стандартамі бяспекі. Не дапускайце траплення буфера на скуру, вочы і слізістыя абалонкі. Калі гэта ўсё ж адбудзецца, неадкладна прамыйце вялікай колькасцю вады і звярніцеся па медыцынскую дапамогу.
2. Калі раствор выпадае асадак, яго неабходна акунуць у ваду з тэмпературай 30℃ да поўнага растварэння асадка перад ужываннем.
3. Калі суспензія магнітных шарыкаў замарожаная, не выкарыстоўвайце яе.
4. Розныя буферы ў гэтым наборы ўтрымліваюць солі гуанідыну. Не выкарыстоўвайце для іх апрацоўкі акісляльныя дэзінфікуючыя сродкі, такія як гіпахларыт натрыю, інакш будуць вылучацца таксічныя газы, і з імі трэба будзе апрацоўваць медыцынскія адходы.
5. Падчас элюцыі могуць заставацца рэшткі магнітных шарыкаў. Паспрабуйце пазбягаць удыхання магнітных шарыкаў пры аспірацыі ўзораў.