2× PCR премикс (с багрило) HYA442
2× PCR Master Mix съдържа Taq ДНК полимераза, dNTP и други компоненти, необходими за PCR. Master Mix е стабилен в продължение на 3 месеца при 4℃ с нашите персонализирани стабилизатори. Разтворът за предварителна смес е оптимизиран за конвенционална PCR и е готов за употреба чрез добавяне на ДНК матрица и праймери. PCR продуктите могат да бъдат заредени директно за електрофореза с предварително заредено бромофенол синьо багрило. Амплифицираните продукти съдържат 3'-dA издатина и могат лесно да бъдат клонирани в Т вектор. 2× PCR Master Mix опростява PCR процедурата и намалява замърсяването.
Компоненти
| Компоненти | Размер-1 | Размер-2 | Размер-3 |
| 2× PCR премикс (с багрило) | 5 мл | 1 мл × 15 | 1 мл × 50 |
Съхранение
Съхранявайте при -20°C в продължение на 2 години.
Инструкции
1. Реакционна система
| Компоненти | Обем |
| 2× PCR премикс (с багрило) | 25 мкл |
| Преден праймер (10 μM) | 2 µL |
| Обратен праймер (10 μM) | 2 µL |
| ДНК шаблон* | Променлива |
| ддХ2НА | До 50 µL |
*Използване на шаблон: 50-200 ng геномна ДНК; 0.1-10 ng плазмидна ДНК
2. Програма за реакция
| Стъпка | Температура | Време | Цикли |
| Първоначална денатурация | 94 ℃ | 5 мин. | 1 |
| Денатурация | 94 ℃ | 30 сек. | 35 |
| Отгряване | 50-60 ℃ | 30 сек. | |
| Разширение | 72 ℃ | 30-60 сек/кб | |
| Последно удължаване | 72 ℃ | 10 мин. | 1 |
| Задръжте | 4 ℃ | - | 1 |
1. Магнезий2+ концентрация: Този продукт съдържа 3 mM MgCl2, подходящ за повечето PCR реакции.
2. Температура на отгряване: Моля, вижте теоретичната Tm стойност на грундовете. Температурата на отгряване може да бъде настроена на 2-5℃ по-ниска от теоретичната стойност на грунда.
3. Време за удължаване: За молекулярна идентификация се препоръчва 30 сек/kb. За клониране на гени се препоръчва 60 сек/kb.
Бележки
1. PCR продуктите с 2× PCR Master Mix не са подходящи за полиакриламидна гел електрофореза.
2. За ваша безопасност и здраве, моля, носете лабораторни престилки и ръкавици за еднократна употреба по време на работа.
3. Използва се САМО за изследователска цел!