Магнитен универсален комплект за вирусна ДНК/РНК HYD521
Универсалният магнитен комплект за вирусна ДНК/РНК е подходящ за екстрахиране на вирусна нуклеинова киселина от пълна кръв или безклетъчни телесни течности (като серум, плазма, цереброспинална течност, назални/фарингеални тампони, алвеоларна лаважна течност и др.). Този метод използва технология за пречистване с магнитни перли и не изисква екстракция с токсичен фенол-хлороформ по време на процеса на екстракция. Той е безопасен, нетоксичен и бърз. Полученият продукт може да се използва директно в PCR, qPCR, секвениране от второ поколение и други експерименти. Когато се използва с автоматизирани инструменти за екстракция с магнитни перли, може да се постигне високопроизводителна екстракция на нуклеинови киселини.
Информация за продукта
| Компоненти | 48T |
| Разтвор за лизис и свързване | 33 мл |
| Магнитно окачване на мъниста | 1,1 мл |
| Промивен буфер А | 40 мл |
| Промивен буфер B | 80 мл |
| Елуиращ разтвор | 10 мл |
| Протеиназа К | 1,1 мл |
Условия за съхранение
Протеиназа К трябва да се съхранява при 2~8℃, а останалите съставки трябва да се съхраняват при стайна температура. Срокът на годност е 18 месеца.
Примерно описание
1. Приложими видове проби: пълна кръв, серум, плазма, цереброспинална течност, назални/фарингеални тампони, течност от алвеоларна промивка и други проби.
2. Съхранение и транспортиране на пробите: Пробите могат да се използват за тестване веднага или да се съхраняват при -70℃ или по-ниска температура. Периодът на съхранение е 6 месеца. Трябва да се избягва многократно замразяване и размразяване. Пробите се транспортират чрез студена верига.
3. Изисквания за замразяване и размразяване: Бързо замразяване и размразяване, избягвайте многократно замразяване и размразяване.
Операция
Преди експеримента проверете дали разтворът има утайка и дали магнитните перли могат да бъдат ресуспендирани.
1. Прехвърлете 200~300 μL от пробата в 1,5 mL центрофужна епруветка, добавете последователно 600 μL лизисен и свързващ разтвор, 20 μL протеиназа К и 20 μL суспензия от магнитни перли и разбъркайте на вортекс с висока скорост за 30 секунди. Инкубирайте при 50℃ за 5~7 минути. Ако термостатът няма функция за осцилация, разбъркайте на вортекс 3 пъти по време на инкубационния период, всеки път за 15 секунди.
2. Прехвърлете в 1,5 mL магнитна стойка за магнитно разделяне, докато разтворът стане бистър и прозрачен, след което го изхвърлете.
3. Добавете 700 μL промивен буфер А, разбъркайте на вортекс за 10 секунди, за да разчупите магнитните перли, след което прехвърлете в магнитна стойка за магнитно разделяне, докато разтворът стане бистър, и изхвърлете разтвора.
4. Добавете 700 μL промивен буфер B, разбъркайте на вортекс за 10 s, за да разчупите магнитните перли, прехвърлете в магнитна стойка за магнитно разделяне, докато разтворът стане бистър, и изхвърлете разтвора.
5. Добавете отново 700 μL промивен буфер B, разбъркайте на вортекс за 10 s, за да разчупите магнитните перли, прехвърлете в магнитна стойка за магнитно разделяне, докато разтворът стане бистър, и изхвърлете разтвора.
6. Центрофугирайте за кратко, за да съберете капчици по стената на епруветката, прехвърлете ги върху магнитна стойка за избистряне и абсорбирайте останалата течност. Изсушете на въздух за 3-5 минути.
Забележка: Остатъците от етанол ще инхибират последващите ензимни реакции, затова се уверете, че етанолът се изпарява напълно при сушене. Не сушете твърде дълго, за да не повлияете на последващия ефект на елуиране.
7. Добавете 40~100 μL елуиращ разтвор, разбъркайте на вортекс с висока скорост за 2~3 минути, за да разчупите магнитните перли. Инкубирайте при 60℃ за 5 минути, след което разбъркайте на вортекс с висока скорост за 60 секунди.
8. Центрофугирайте незабавно, за да съберете течността от капачката на епруветката и я прехвърлете върху магнитната поставка, докато магнитните перли се адсорбират напълно. След това внимателно прехвърлете течността в нова центрофужна епруветка, за да получите разтвора на нуклеиновата киселина.
9. Разтворът на нуклеинова киселина може да се съхранява при -20°C за краткосрочно съхранение и -80°C за дългосрочно съхранение.
Бележки
1. Различните буфери в този комплект съдържат гуанидинови соли. За ваша безопасност и здраве, моля, носете лабораторна престилка и ръкавици за еднократна употреба. И работете съгласно предпазните мерки за безопасност. Не позволявайте на буфера да влезе в контакт с кожата, очите и лигавиците. Ако това се случи, моля, измийте незабавно обилно с вода и потърсете медицинска помощ.
2. Ако разтворът се утаи, той трябва да се потопи във вода с температура 30℃, докато утайката се разтвори напълно преди употреба.
3. Ако суспензията от магнитни перли е замразена, не я използвайте.
4. Различните буфери в този комплект съдържат гуанидинови соли. Не използвайте окисляващи дезинфектанти като натриев хипохлорит за третирането им, в противен случай ще се отделят токсични газове и те трябва да се третират като медицински отпадък.
5. По време на елуирането може да има остатъчни магнитни перли. Опитайте се да избягвате вдишването на магнитни перли при аспириране на проби.