2× PCR premiks (sa bojom) HYA442
2× PCR Master Mix sadrži Taq DNA polimerazu, dNTP-ove i druge komponente potrebne za PCR. Master Mix je stabilan 3 mjeseca na 4℃ s našim prilagođenim stabilizatorima. Prethodno pripremljena otopina je optimizirana za konvencionalnu PCR i spremna je za upotrebu dodavanjem DNA kalupa i primera. PCR produkti se mogu direktno učitati za elektroforezu s prethodno učitanom bromofenol plavom bojom. Amplificirani produkti sadrže 3'-dA izbočinu i mogu se lako klonirati u T vektor. 2× PCR Master Mix pojednostavljuje PCR postupak i smanjuje kontaminaciju.
Komponente
| Komponente | Veličina-1 | Veličina-2 | Veličina-3 |
| 2× PCR premiks (sa bojom) | 5 ml | 1 mL × 15 | 1 mL × 50 |
Skladištenje
Čuvati na -20°C tokom 2 godine.
Upute
1. Reakcijski sistem
| Komponente | Volumen |
| 2× PCR premiks (sa bojom) | 25 μL |
| Prednji primer (10 μM) | 2 µL |
| Obrnuti primer (10 μM) | 2 µL |
| DNK šablon* | Varijabla |
| ddH2THE | Do 50 µL |
*Upotreba šablona: 50-200 ng genomske DNK; 0,1-10 ng plazmidne DNK
2. Program reakcija
| Korak | Temperatura | Vrijeme | Ciklusi |
| Početna denaturacija | 94 ℃ | 5 minuta | 1 |
| Denaturacija | 94 ℃ | 30 sekundi | 35 |
| Žarenje | 50-60 ℃ | 30 sekundi | |
| Proširenje | 72 ℃ | 30-60 sekundi/kb | |
| Konačno produženje | 72 ℃ | 10 minuta | 1 |
| Drži | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ koncentracija: Ovaj proizvod sadrži 3 mM MgCl2, pogodan za većinu PCR reakcija.
2. Temperatura žarenja: Molimo pogledajte teorijsku Tm vrijednost primera. Temperatura žarenja može se podesiti na 2-5℃ niže od teorijske vrijednosti primera.
3. Vrijeme ekstenzije: Za molekularnu identifikaciju preporučuje se 30 sekundi/kb. Za kloniranje gena preporučuje se 60 sekundi/kb.
Bilješke
1. PCR proizvodi sa 2× PCR Master Mixom nisu pogodni za elektroforezu u poliakrilamidnom gelu.
2. Radi vaše sigurnosti i zdravlja, molimo vas da tokom rada nosite laboratorijske mantile i rukavice za jednokratnu upotrebu.
3. Koristi se SAMO u istraživačke svrhe!