Kit d'ADN/ARN viral universal magnètic HYD521
El kit magnètic universal d'ADN/ARN viral és adequat per extreure àcid nucleic viral de sang sencera o fluids corporals lliures de cèl·lules (com ara sèrum, plasma, líquid cefaloraquidi, hisops nasals/faringis, líquid de rentat alveolar, etc.). Aquest mètode utilitza tecnologia de purificació amb perles magnètiques i no cal cap extracció amb cloroform de fenol tòxic durant el procés d'extracció. És segur, no tòxic i ràpid. El producte obtingut es pot utilitzar directament en PCR, qPCR, seqüenciació de segona generació i altres experiments. Quan s'utilitza amb instruments d'extracció automatitzada amb perles magnètiques, es pot aconseguir una extracció d'alt rendiment d'àcids nucleics.
Informació del producte
| components | 48T |
| Solució de lisi i unió | 33 ml |
| Suspensió de perles magnètiques | 1,1 mL |
| Tampó de rentat A | 40 ml |
| Tampó de rentat B | 80 ml |
| Solució d'elució | 10 ml |
| Proteinasa K | 1,1 mL |
Condicions d'emmagatzematge
La proteinasa K s'ha de conservar a 2~8 ℃ i els altres ingredients s'han de conservar a temperatura ambient. La vida útil és de 18 mesos.
Descripció de la mostra
1. Tipus de mostres aplicables: sang sencera, sèrum, plasma, líquid cefaloraquidi, hisops nasals/faringis, líquid de rentat alveolar i altres mostres.
2. Emmagatzematge i transport de mostres: Les mostres es poden utilitzar per a la prova immediatament o emmagatzemar-les a -70 ℃ o menys per a la prova. El període d'emmagatzematge és de 6 mesos. S'ha d'evitar la congelació i descongelació repetides. Les mostres es transporten per cadena de fred.
3. Requisits de congelació i descongelació: congelació i descongelació ràpides, evitar la congelació i descongelació repetides.
Operació
Abans de l'experiment, comproveu si la solució ha precipitat i si les perles magnètiques es poden resuspendre.
1. Transferiu 200~300 μL de mostra a un tub de centrífuga d'1,5 mL, afegiu-hi 600 μL de solució de lisi i unió, 20 μL de proteinasa K i 20 μL de suspensió de perles magnètiques en seqüència i remeneu amb el vòrtex a alta velocitat durant 30 segons. Incubeu a 50 ℃ durant 5~7 minuts. Si el termòstat no té funció d'oscil·lació, remeneu amb el vòrtex 3 vegades durant el període d'incubació, cada vegada durant 15 segons.
2. Transferiu a un suport magnètic d'1,5 mL per a la separació magnètica fins que la solució sigui clara i transparent i descarteu-la.
3. Afegiu 700 μL de tampó de rentat A, remeneu amb vòrtex durant 10 segons per trencar les perles magnètiques i, a continuació, transferiu-les a un suport magnètic per a la separació magnètica fins que la solució sigui clara i descarteu-la.
4. Afegiu 700 μL de tampó de rentat B, remeneu amb vòrtex durant 10 s per trencar les perles magnètiques, transferiu-les a un suport magnètic per a la separació magnètica fins que la solució sigui clara i descarteu-la.
5. Afegiu de nou 700 μL de tampó de rentat B, remeneu amb vòrtex durant 10 s per trencar les perles magnètiques, transferiu-les a un suport magnètic per a la separació magnètica fins que la solució sigui clara i descarteu-la.
6. Centrifugar breument per recollir les gotes a la paret del tub, transferir-les a un suport magnètic per a la seva clarificació i absorbir el líquid residual. Assecar a l'aire durant 3-5 minuts.
Nota: Els residus d'etanol inhibiran les reaccions enzimàtiques posteriors, així que assegureu-vos que l'etanol s'evapori completament durant l'assecat. No assequeu durant massa temps per evitar afectar l'efecte d'elució posterior.
7. Afegiu 40~100 μL de solució d'elució, remeneu amb vòrtex a alta velocitat durant 2~3 min per trencar les perles magnètiques. Incubeu a 60 ℃ durant 5 min i després remeneu amb vòrtex a alta velocitat durant 60 s.
8. Centrifugació instantània per recollir el líquid del tap del tub i transferir-lo a la reixeta magnètica fins que les perles magnètiques s'hagin adsorbit completament. A continuació, transfereixi amb cura el líquid a un nou tub de centrífuga per obtenir la solució d'àcid nucleic.
9. La solució d'àcid nucleic es pot emmagatzemar a -20 °C per a emmagatzematge a curt termini i a -80 °C per a emmagatzematge a llarg termini.
Notes
1. Els diversos tampons d'aquest kit contenen sals de guanidina. Per a la vostra seguretat i salut, porteu una bata de laboratori i guants d'un sol ús. I manipuleu-los d'acord amb les precaucions estàndard de seguretat. No deixeu que el tampó entri en contacte amb la pell, els ulls i les membranes mucoses. Si passa, renteu-vos immediatament amb aigua abundant i busqueu atenció mèdica.
2. Si la solució precipita, cal banyar-la en aigua a 30 ℃ fins que el precipitat es dissolgui completament abans d'utilitzar-la.
3. Si la suspensió de perles magnètiques està congelada, no la feu servir.
4. Els diversos tampons d'aquest kit contenen sals de guanidina. No utilitzeu desinfectants oxidants com l'hipoclorit de sodi per tractar-los, ja que en cas contrari s'alliberaran gasos tòxics i s'han de tractar com a residus mèdics.
5. Pot haver-hi perles magnètiques residuals durant l'elució. Intenteu evitar inhalar perles magnètiques en aspirar mostres.