2× Rhaggymysgedd PCR (gyda Lliw) HYA442
Mae Cymysgedd Meistr PCR 2× yn cynnwys Polymerase DNA Taq, dNTPs, a chydrannau eraill sy'n ofynnol ar gyfer PCR. Mae'r Cymysgedd Meistr yn sefydlog am 3 mis ar 4℃ gyda'n sefydlogwyr wedi'u haddasu. Mae'r toddiant cyn-gymysgedd wedi'i optimeiddio ar gyfer PCR confensiynol ac yn barod i'w ddefnyddio trwy ychwanegu templed DNA a phreimwyr. Gellir llwytho'r cynhyrchion PCR yn uniongyrchol ar gyfer electrofforesis gyda llifyn glas bromoffenol wedi'i lwytho ymlaen llaw. Mae'r cynhyrchion wedi'u mwyhau yn cynnwys ymwthiad 3'-dA a gellir eu clonio'n hawdd i mewn i fector T. Mae Cymysgedd Meistr PCR 2× yn symleiddio'r weithdrefn PCR ac yn lleihau halogiad.
Cydrannau
| Cydrannau | Maint-1 | Maint-2 | Maint-3 |
| 2× Rhaggymysgedd PCR (gyda Lliw) | 5mL | 1 mL × 15 | 1 mL × 50 |
Storio
Storiwch ar -20°C am 2 flynedd.
Cyfarwyddiadau
1. System Adwaith
| Cydrannau | Cyfaint |
| 2× Rhaggymysgedd PCR (gyda Lliw) | 25 uL |
| Primer Ymlaen (10 μM) | 2 µL |
| Primydd Gwrthdro (10 μM) | 2 µL |
| Templed DNA* | Newidyn |
| ddH2Y | Hyd at 50 µL |
*Defnydd templed: 50-200 ng DNA genomig; 0.1-10 ng DNA plasmid
2. Rhaglen Adwaith
| Cam | Tymheredd | Amser | Cylchoedd |
| Dadnatureiddio Cychwynnol | 94 ℃ | 5 munud | 1 |
| Dadnatureiddio | 94 ℃ | 30 eiliad | 35 |
| Anelio | 50-60 ℃ | 30 eiliad | |
| Estyniad | 72 ℃ | 30-60 eiliad/kb | |
| Estyniad Terfynol | 72 ℃ | 10 munud | 1 |
| Daliwch | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ crynodiad: Mae'r cynnyrch hwn yn cynnwys 3 mM o MgCl2, addas ar gyfer y rhan fwyaf o adweithiau PCR.
2. Tymheredd anelio: Cyfeiriwch at werth Tm damcaniaethol y primerau. Gellir gosod y tymheredd anelio i 2-5 ℃ yn is na gwerth damcaniaethol y primer.
3. Amser estyniad: Ar gyfer adnabod moleciwlaidd, argymhellir 30 eiliad/kb. Ar gyfer clonio genynnau, argymhellir 60 eiliad/kb.
Nodiadau
1. Nid yw cynhyrchion PCR gyda 2× Cymysgedd Meistr PCR yn addas ar gyfer electrofforesis gel polyacrylamid.
2. Er eich diogelwch a'ch iechyd, gwisgwch gotiau labordy a menig tafladwy ar gyfer y llawdriniaeth.
3. Fe'i defnyddir ar gyfer ymchwil YN UNIG!