Magnetisk universelt viralt DNA/RNA-kit HYD521
Magnetic Universal Viral DNA/RNA Kit er egnet til ekstraktion af viral nukleinsyre fra fuldblod eller cellefri kropsvæsker (såsom serum, plasma, cerebrospinalvæske, nasale/svælgpodninger, alveolær skyllevæske osv.). Denne metode bruger magnetisk perleoprensningsteknologi, og der kræves ingen giftig phenolchloroformekstraktion under ekstraktionsprocessen. Den er sikker, giftfri og hurtig. Det opnåede produkt kan anvendes direkte i PCR, qPCR, andengenerationssekventering og andre eksperimenter. Når det bruges sammen med automatiserede ekstraktionsinstrumenter med magnetiske perler, kan der opnås højkapacitetsekstraktion af nukleinsyrer.
Produktinformation
| Komponenter | 48T |
| Lyse- og bindingsopløsning | 33 ml |
| Magnetisk perleophæng | 1,1 ml |
| Vaskebuffer A | 40 ml |
| Vaskebuffer B | 80 ml |
| Elueringsopløsning | 10 ml |
| Proteinase K | 1,1 ml |
Opbevaringsforhold
Proteinase K bør opbevares ved 2~8 ℃, og de andre ingredienser bør opbevares ved stuetemperatur. Holdbarheden er 18 måneder.
Eksempelbeskrivelse
1. Anvendelige prøvetyper: fuldblod, serum, plasma, cerebrospinalvæske, næse-/svælgpodninger, alveolær skyllevæske og andre prøver.
2. Opbevaring og transport af prøver: Prøver kan bruges til testning med det samme eller opbevares ved -70 ℃ eller lavere. Opbevaringsperioden er 6 måneder. Gentagen frysning og optøning bør undgås. Prøver transporteres via kølekæde.
3. Krav til frysning og optøning: Hurtig frysning og optøning, undgå gentagen frysning og optøning.
Operation
Før eksperimentet skal du kontrollere, om opløsningen har udfældning, og om de magnetiske perler kan resuspenderes.
1. Overfør 200~300 μL prøve til et 1,5 ml centrifugerør, tilsæt 600 μL lysis- og bindingsopløsning, 20 μL proteinase K og 20 μL magnetisk perlesuspension i rækkefølge, og vortex-bland ved høj hastighed i 30 sekunder. Inkuber ved 50 ℃ i 5~7 minutter. Hvis termostaten ikke har en oscillationsfunktion, vortex-bland 3 gange i løbet af inkubationsperioden, hver gang i 15 sekunder.
2. Overfør til et 1,5 ml magnetisk stativ til magnetisk separation, indtil opløsningen er klar og gennemsigtig, og kasser derefter opløsningen.
3. Tilsæt 700 μL vaskebuffer A, vortex-bland i 10 sekunder for at opløse de magnetiske perler, og overfør derefter til et magnetisk stativ til magnetisk separation, indtil opløsningen er klar, og kasser derefter opløsningen.
4. Tilsæt 700 μL vaskebuffer B, bland med en vortex i 10 sekunder for at opløse de magnetiske perler, overfør til et magnetisk stativ til magnetisk separation, indtil opløsningen er klar, og kasser opløsningen.
5. Tilsæt 700 μL vaskebuffer B igen, bland med en vortex i 10 sekunder for at opløse de magnetiske perler, overfør til et magnetisk stativ til magnetisk separation, indtil opløsningen er klar, og kasser opløsningen.
6. Centrifuger kort for at opsamle dråber på rørvæggen, overfør til et magnetisk stativ til klaring, og absorber den resterende væske. Lufttør i 3-5 min.
Bemærk: Ethanolrester vil hæmme efterfølgende enzymreaktioner, så sørg for, at ethanolen fordamper helt under tørring. Tør ikke for længe for at undgå at påvirke den efterfølgende elueringseffekt.
7. Tilsæt 40~100 μL elueringsopløsning, og vortex-bland ved høj hastighed i 2~3 minutter for at opløse de magnetiske perler. Inkuber ved 60 ℃ i 5 minutter, og vortex-bland derefter ved høj hastighed i 60 sekunder.
8. Centrifugér straks for at opsamle væsken fra rørets låg og overfør den til det magnetiske stativ, indtil de magnetiske perler er fuldstændigt adsorberet. Overfør derefter forsigtigt væsken til et nyt centrifugerør for at få nukleinsyreopløsningen.
9. Nukleinsyreopløsningen kan opbevares ved -20 °C til korttidsopbevaring og -80 °C til langtidsopbevaring.
Noter
1. De forskellige buffere i dette sæt indeholder guanidinsalte. Af hensyn til din sikkerhed og dit helbred bedes du bruge en laboratoriekittel og engangshandsker. Håndter i henhold til sikkerhedsstandarderne. Bufferen må ikke komme i kontakt med hud, øjne og slimhinder. Hvis det sker, skal du straks skylle med rigeligt vand og søge lægehjælp.
2. Hvis opløsningen udfældes, skal den overhældes med 30 ℃ vand, indtil bundfaldet er helt opløst, før den bruges.
3. Hvis den magnetiske perlesuspension er frossen, må den ikke anvendes.
4. De forskellige buffere i dette sæt indeholder guanidinsalte. Brug ikke oxiderende desinfektionsmidler såsom natriumhypochlorit til at behandle dem, da der ellers vil blive frigivet giftige gasser, og de skal behandles som medicinsk affald.
5. Der kan være resterende magnetiske perler under eluering. Undgå at inhalere magnetiske perler under aspiration af prøver.