2× Πρόμιγμα PCR (με χρωστική) HYA442
Το 2× PCR Master Mix περιέχει Taq DNA πολυμεράση, dNTPs και άλλα συστατικά που απαιτούνται για την PCR. Το Master Mix είναι σταθερό για 3 μήνες στους 4℃ με τους προσαρμοσμένους σταθεροποιητές μας. Το διάλυμα προανάμειξης είναι βελτιστοποιημένο για συμβατική PCR και έτοιμο προς χρήση με την προσθήκη προτύπου DNA και εκκινητών. Τα προϊόντα PCR μπορούν να φορτωθούν απευθείας για ηλεκτροφόρηση με προφορτωμένη χρωστική βρωμοφαινόλης μπλε. Τα ενισχυμένα προϊόντα περιέχουν προεξοχή 3'-dA και μπορούν εύκολα να κλωνοποιηθούν σε φορέα Τ. Το 2× PCR Master Mix απλοποιεί τη διαδικασία PCR και μειώνει τη μόλυνση.
Στοιχεία
| Στοιχεία | Μέγεθος-1 | Μέγεθος-2 | Μέγεθος-3 |
| 2× Πρόμιγμα PCR (με χρωστική) | 5 ml | 1 mL×15 | 1 ml×50 |
Αποθήκευση
Φυλάσσετε στους -20°C για 2 χρόνια.
Οδηγίες
1. Σύστημα αντίδρασης
| Στοιχεία | Τόμος |
| 2× Πρόμιγμα PCR (με χρωστική) | 25 μL |
| Προωθητικό αστάρι (10 μM) | 2 μL |
| Αντίστροφο αστάρι (10 μM) | 2 μL |
| Πρότυπο DNA* | Μεταβλητός |
| ηηη2Ο | Έως 50 µL |
*Χρήση προτύπου: 50-200 ng γονιδιωματικού DNA. 0,1-10 ng πλασμιδικού DNA
2. Πρόγραμμα Αντίδρασης
| Βήμα | Θερμοκρασία | Φορά | Κύκλοι |
| Αρχική μετουσίωση | 94 ℃ | 5 λεπτά | 1 |
| Μετουσίωση | 94 ℃ | 30 δευτερόλεπτα | 35 |
| Ξεπύρωμα | 50-60 ℃ | 30 δευτερόλεπτα | |
| Επέκταση | 72 ℃ | 30-60 δευτ./kb | |
| Τελική Επέκταση | 72 ℃ | 10 λεπτά | 1 |
| Αμπάρι | 4 ℃ | - | 1 |
1. Μαγνήσιο2+ συγκέντρωση: Αυτό το προϊόν περιέχει 3 mM MgCl32, κατάλληλο για τις περισσότερες αντιδράσεις PCR.
2. Θερμοκρασία ανόπτησης: Ανατρέξτε στη θεωρητική τιμή Tm των ασταριών. Η θερμοκρασία ανόπτησης μπορεί να ρυθμιστεί 2-5℃ χαμηλότερα από τη θεωρητική τιμή του ασταριού.
3. Χρόνος παράτασης: Για μοριακή ταυτοποίηση, συνιστώνται 30 sec/kb. Για κλωνοποίηση γονιδίων, συνιστώνται 60 sec/kb.
Σημειώσεις
1. Τα προϊόντα PCR με 2× PCR Master Mix δεν είναι κατάλληλα για ηλεκτροφόρηση σε γέλη πολυακρυλαμιδίου.
2. Για την ασφάλεια και την υγεία σας, παρακαλούμε να φοράτε εργαστηριακές ρόμπες και γάντια μιας χρήσης κατά τη λειτουργία.
3. Χρησιμοποιείται ΜΟΝΟ για ερευνητική χρήση!