Μαγνητικό κιτ καθολικού ιικού DNA/RNA HYD521
Το μαγνητικό κιτ Universal Viral DNA/RNA είναι κατάλληλο για την εξαγωγή ιικού νουκλεϊκού οξέος από πλήρες αίμα ή σωματικά υγρά χωρίς κύτταρα (όπως ορός, πλάσμα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό, ρινικά/φαρυγγικά επιχρίσματα, υγρό κυψελιδικής έκπλυσης κ.λπ.). Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί τεχνολογία καθαρισμού μαγνητικών σφαιριδίων και δεν απαιτείται εκχύλιση με τοξική φαινόλη-χλωροφόρμιο κατά τη διάρκεια της διαδικασίας εκχύλισης. Είναι ασφαλής, μη τοξική και γρήγορη. Το λαμβανόμενο προϊόν μπορεί να χρησιμοποιηθεί απευθείας σε PCR, qPCR, αλληλούχιση δεύτερης γενιάς και άλλα πειράματα. Όταν χρησιμοποιείται με όργανα αυτοματοποιημένης εκχύλισης με μαγνητικά σφαιρίδια, μπορεί να επιτευχθεί εκχύλιση νουκλεϊκών οξέων υψηλής απόδοσης.
Πληροφορίες προϊόντος
| Στοιχεία | 48Τ |
| Διάλυμα Λύσης και Σύνδεσης | 33 ml |
| Μαγνητική ανάρτηση σφαιριδίων | 1,1 ml |
| Ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης Α | 40 ml |
| Ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης Β | 80 ml |
| Διάλυμα έκλουσης | 10 ml |
| Πρωτεϊνάση Κ | 1,1 ml |
Συνθήκες αποθήκευσης
Η πρωτεϊνάση Κ πρέπει να φυλάσσεται στους 2~8℃ και τα άλλα συστατικά πρέπει να φυλάσσονται σε θερμοκρασία δωματίου. Η διάρκεια ζωής είναι 18 μήνες.
Δείγμα Περιγραφής
1. Εφαρμοστέοι τύποι δειγμάτων: πλήρες αίμα, ορός, πλάσμα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό, ρινικά/φαρυγγικά επιχρίσματα, υγρό κυψελιδικής έκπλυσης και άλλα δείγματα.
2. Αποθήκευση και μεταφορά δειγμάτων: Τα δείγματα μπορούν να χρησιμοποιηθούν για άμεση εξέταση ή να αποθηκευτούν στους -70℃ ή χαμηλότερα για εξέταση. Η περίοδος αποθήκευσης είναι 6 μήνες. Πρέπει να αποφεύγεται η επαναλαμβανόμενη κατάψυξη και απόψυξη. Τα δείγματα μεταφέρονται μέσω ψυκτικής αλυσίδας.
3. Απαιτήσεις κατάψυξης-απόψυξης: Γρήγορη κατάψυξη και απόψυξη, αποφυγή επαναλαμβανόμενης κατάψυξης και απόψυξης.
Λειτουργία
Πριν από το πείραμα, ελέγξτε εάν το διάλυμα έχει καθίζηση και εάν τα μαγνητικά σφαιρίδια μπορούν να επαναιωρηθούν.
1. Μεταφέρετε 200~300 μL δείγματος σε έναν φυγοκεντρικό σωλήνα 1,5 mL, προσθέστε 600 μL διαλύματος λύσης και σύνδεσης, 20 μL πρωτεϊνάσης Κ και 20 μL εναιωρήματος μαγνητικών σφαιριδίων διαδοχικά και ανακινήστε σε υψηλή ταχύτητα για 30 δευτερόλεπτα. Επωάστε στους 50℃ για 5~7 λεπτά. Εάν ο θερμοστάτης δεν διαθέτει λειτουργία ταλάντωσης, ανακινήστε σε vortex 3 φορές κατά τη διάρκεια της περιόδου επώασης, κάθε φορά για 15 δευτερόλεπτα.
2. Μεταφέρετε σε μαγνητική βάση 1,5 mL για μαγνητικό διαχωρισμό μέχρι το διάλυμα να γίνει διαυγές και διαφανές και απορρίψτε το διάλυμα.
3. Προσθέστε 700 μL ρυθμιστικού διαλύματος πλύσης Α, ανακινήστε με στροβιλισμό για 10 δευτερόλεπτα για να διασπαστούν οι μαγνητικές χάντρες και, στη συνέχεια, μεταφέρετέ το σε μαγνητική βάση για μαγνητικό διαχωρισμό μέχρι το διάλυμα να γίνει διαυγές και απορρίψτε το διάλυμα.
4. Προσθέστε 700 μL ρυθμιστικού διαλύματος πλύσης Β, ανακινήστε με στροβιλισμό για 10 δευτερόλεπτα για να διασπαστούν οι μαγνητικές χάντρες, μεταφέρετε σε μαγνητική βάση για μαγνητικό διαχωρισμό μέχρι το διάλυμα να γίνει διαυγές και απορρίψτε το διάλυμα.
5. Προσθέστε ξανά 700 μL ρυθμιστικού διαλύματος πλύσης Β, ανακινήστε με στροβιλισμό για 10 δευτερόλεπτα για να διασπαστούν οι μαγνητικές χάντρες, μεταφέρετε σε μαγνητική βάση για μαγνητικό διαχωρισμό μέχρι το διάλυμα να γίνει διαυγές και απορρίψτε το διάλυμα.
6. Φυγοκεντρήστε για λίγο για να συλλέξετε σταγονίδια στο τοίχωμα του σωλήνα, μεταφέρετέ τα σε μαγνητική βάση για διαύγαση και απορροφήστε το υπολειμματικό υγρό. Στεγνώστε στον αέρα για 3-5 λεπτά.
Σημείωση: Τα υπολείμματα αιθανόλης θα αναστείλουν τις επόμενες ενζυμικές αντιδράσεις, γι' αυτό βεβαιωθείτε ότι η αιθανόλη εξατμίζεται πλήρως κατά την ξήρανση. Μην στεγνώνετε για πολύ ώρα για να μην επηρεαστεί το επακόλουθο αποτέλεσμα έκλουσης.
7. Προσθέστε 40~100 μL διαλύματος έκλουσης, ανακινήστε σε υψηλή ταχύτητα για 2~3 λεπτά για να διασπαστούν τα μαγνητικά σφαιρίδια. Επωάστε στους 60℃ για 5 λεπτά και στη συνέχεια ανακινήστε σε υψηλή ταχύτητα για 60 δευτερόλεπτα.
8. Φυγοκεντρήστε στιγμιαία για να συλλέξετε το υγρό από το καπάκι του σωλήνα και μεταφέρετέ το στη μαγνητική βάση μέχρι να απορροφηθούν πλήρως τα μαγνητικά σφαιρίδια. Στη συνέχεια, μεταφέρετε προσεκτικά το υγρό σε έναν νέο σωλήνα φυγοκέντρησης για να λάβετε το διάλυμα νουκλεϊκού οξέος.
9. Το διάλυμα νουκλεϊκού οξέος μπορεί να αποθηκευτεί στους -20°C για βραχυπρόθεσμη αποθήκευση και στους -80°C για μακροχρόνια αποθήκευση.
Σημειώσεις
1. Τα διάφορα ρυθμιστικά διαλύματα σε αυτό το κιτ περιέχουν άλατα γουανιδίνης. Για την ασφάλεια και την υγεία σας, φορέστε ρόμπα εργαστηρίου και γάντια μιας χρήσης. Και χειριστείτε το σύμφωνα με τις προφυλάξεις ασφαλείας. Μην αφήνετε το ρυθμιστικό διάλυμα να έρθει σε επαφή με το δέρμα, τα μάτια και τους βλεννογόνους. Εάν συμβεί αυτό, ξεπλύνετε αμέσως με άφθονο νερό και ζητήστε ιατρική βοήθεια.
2. Εάν το διάλυμα καθιζάνει, πρέπει να βρεθεί σε νερό 30℃ μέχρι να διαλυθεί πλήρως το ίζημα πριν από τη χρήση.
3. Εάν το εναιώρημα μαγνητικών σφαιριδίων είναι κατεψυγμένο, μην το χρησιμοποιήσετε.
4. Τα διάφορα ρυθμιστικά διαλύματα σε αυτό το κιτ περιέχουν άλατα γουανιδίνης. Μην χρησιμοποιείτε οξειδωτικά απολυμαντικά όπως υποχλωριώδες νάτριο για την επεξεργασία τους, διαφορετικά θα απελευθερωθούν τοξικά αέρια και θα πρέπει να αντιμετωπίζονται ως ιατρικά απόβλητα.
5. Ενδέχεται να υπάρχουν υπολείμματα μαγνητικών σφαιριδίων κατά την έκλουση. Προσπαθήστε να αποφύγετε την εισπνοή μαγνητικών σφαιριδίων κατά την αναρρόφηση δειγμάτων.