2× Premix PCR (con colorante) HYA442
La mezcla maestra 2× PCR contiene ADN polimerasa Taq, dNTPs y otros componentes necesarios para la PCR. Esta mezcla maestra se mantiene estable durante 3 meses a 4 °C gracias a nuestros estabilizadores personalizados. La solución premezclada está optimizada para la PCR convencional y lista para usar con solo añadir la plantilla de ADN y los cebadores. Los productos de PCR se pueden cargar directamente para electroforesis con el colorante azul de bromofenol precargado. Los productos amplificados contienen una protuberancia 3'-dA y se pueden clonar fácilmente en el vector T. La mezcla maestra 2× PCR simplifica el procedimiento de PCR y reduce la contaminación.
Componentes
| Componentes | Talla-1 | Talla 2 | Talla 3 |
| Premezcla de PCR 2× (con colorante) | 5 ml | 1 mL × 15 | 1 mL × 50 |
Almacenamiento
Almacenar a -20°C durante 2 años.
Instrucciones
1. Sistema de reacción
| Componentes | Volumen |
| Premezcla de PCR 2× (con colorante) | 25 µL |
| Cebador directo (10 μM) | 2 µL |
| Cebador inverso (10 μM) | 2 µL |
| Plantilla de ADN* | Variable |
| ddH2EL | Hasta 50 µL |
*Uso de plantilla: 50-200 ng de ADN genómico; 0,1-10 ng de ADN plasmídico
2. Programa de reacción
| Paso | Temperatura | Tiempo | Ciclos |
| Desnaturalización inicial | 94 ℃ | 5 minutos | 1 |
| Desnaturalización | 94 ℃ | 30 s | 35 |
| Recocido | 50-60 ℃ | 30 s | |
| Extensión | 72 ℃ | 30-60 segundos/kb | |
| Extensión final | 72 ℃ | 10 minutos | 1 |
| Sostener | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ Concentración: Este producto contiene 3 mM de MgCl2, apto para la mayoría de las reacciones de PCR.
2. Temperatura de recocido: Consulte el valor teórico de Tm de los cebadores. La temperatura de recocido puede ajustarse entre 2 y 5 ℃ por debajo del valor teórico del cebador.
3. Tiempo de extensión: Para la identificación molecular, se recomiendan 30 segundos/kb. Para la clonación de genes, se recomiendan 60 segundos/kb.
Notas
1. Los productos de PCR con 2× PCR Master Mix no son adecuados para la electroforesis en gel de poliacrilamida.
2. Por su seguridad y salud, utilice batas de laboratorio y guantes desechables durante la operación.
3. ¡Su uso es EXCLUSIVO para fines de investigación!