2× PCR Super Mix HYA441
2× PCR Super Mix es una premezcla optimizada que contiene ADN polimerasa, dNTPs y MgCl2Contiene KCl y otros estabilizadores. Solo requiere la adición de cebadores y plantillas para realizar la amplificación. Este producto puede utilizar ADN genómico complejo como plantilla para amplificar un fragmento diana de 5 kb o una plantilla simple, como ADN lambda, para amplificar un fragmento diana de 10 kb. Es adecuado para reacciones de PCR convencionales, construcción de vectores y otras aplicaciones.
Componentes
| Componentes | Talla-1 | Talla 2 | Talla 3 |
| 2× PCR Super Mix | 5 ml | 1 mL × 15 | 1 mL × 100 |
Propiedades
| Especificación | Función |
| actividad exonucleasa 5´-3´ | No |
| actividad exonucleasa 3´-5´ | Sí |
| Fidelidad | 6X Taq |
| Fin del producto | Extremo romo |
Almacenamiento
Almacenar a -20°C.
Instrucciones
1. Sistema de reacción
| Componentes | Sistema de reacción de 25 µL | Sistema de reacción de 50 µL |
| 2× PCR Super Mix | 12,5 µL | 25 µL |
| Cebador directo (10 μM) | 0,5 µL | 1 µL |
| Cebador inverso (10 μM) | 0,5 µL | 1 µL |
| Plantilla de ADN* | Variable | Variable |
| Agua libre de nucleasas | Hasta 25 µL | Hasta 50 µL |
*Nota: La concentración óptima de reacción varía según la plantilla de ADN. Consulte los principios básicos de la PCR a continuación.
2. Programa de reacción
| Paso | Temperatura | Tiempo | Ciclos |
| Desnaturalización inicial | 98 ℃ | 45 s* | 1 |
| Desnaturalización | 98 ℃ | 10 s | 30 |
| Recocido | 55-65 ℃ | 30 s | |
| Extensión | 72℃ | 20-30 s/kb | |
| Extensión final | 72℃ | 5 minutos | 1 |
| Sostener | 4-12 ℃ | - | 1 |
*Nota: En el caso de plantillas de ADN de alta complejidad, el tiempo de predesnaturalización debe extenderse hasta 3 minutos para lograr una desnaturalización completa.