Kit ELISA de ARN de doble cadena (dsRNA) HYJ521
Este kit es un ensayo inmunoenzimático (ELISA) acoplado al sistema biotina-estreptavidina, para la medición cuantitativa de ARN bicatenario (dsRNA) con una longitud superior a 40 pares de bases (pb), independientemente de la secuencia. La placa está pre-recubierta con anticuerpos anti-dsRNA. El dsRNA presente en la muestra se añade y se une a los anticuerpos recubiertos en los pocillos. A continuación, se añade un anticuerpo anti-dsRNA biotinilado que se une al dsRNA de la muestra. Tras el lavado, se añade estreptavidina marcada con peroxidasa de rábano picante (HRP-estreptavidina) que se une al anticuerpo anti-dsRNA biotinilado. Después de la incubación, la HRP-estreptavidina no unida se elimina mediante lavado. Posteriormente, se añade la solución de sustrato TMB, que es catalizada por la HRP para producir un producto de color azul que cambia a amarillo tras añadir la solución de parada ácida. La intensidad del color amarillo es proporcional a la cantidad objetivo de dsRNA capturada en la placa. La absorbancia se mide a 450 nm.
Componentes
| Componentes | 48 T | 96 T |
| Microplaca ELISA | 8×6 | 8×12 |
| Anticuerpo de detección biotinilado (100x) | 60 μL | 120 μL |
| HRP-estreptavidina (100x) | 60 μL | 120 μL |
| Tampón de dilución | 15 ml | 30 ml |
| solución de sustrato TMB | 6 ml | 12 ml |
| Solución de parada | 3 ml | 6 ml |
| Tampón de lavado concentrado (20x) | 20 ml | 40 ml |
| Estándar (UTP, 1 ng/μL) | 7,5 μL | 15 μL |
| Estándar (pUTP, 1 ng/μL) | 7,5 μL | 15 μL |
| Estándar (N1-Me-pUTP, 1 ng/μL) | 7,5 μL | 15 μL |
| Estándar (5-OMe-UTP, 1 ng/μL) | 7,5 μL | 15 μL |
| búfer STE | 25 ml | 50 ml |
| Selladora de placas | 2 piezas | 4 piezas |
Almacenamiento
1. Para el kit sin usar: El kit completo se puede almacenar a 2~8℃ durante su vida útil. Se debe evitar la luz intensa para garantizar su estabilidad durante el almacenamiento.
2. Para kits usados: Una vez abierta la microplaca, cubra los pocillos no utilizados con un sellador de placas y vuelva a colocarla en la bolsa de aluminio que contiene el paquete desecante, cierre la bolsa de aluminio con la cremallera y vuelva a colocarla a 2~8℃ lo antes posible después de su uso.
3. Los demás reactivos deben devolverse a una temperatura de 2~8℃ lo antes posible después de su uso.
Materiales adicionales necesarios
1. Lector de microplacas con filtro de 450 ± 10 nm (preferiblemente que pueda detectar a longitudes de onda de 450 y 650 nm).
2. Agitador de microplacas.
3. Puntas de pipeta y tubos de centrífuga libres de RNasa.