Reactivo de transcripción in vitro T7 de alto rendimiento (dsRNA bajo) HYJ243
El kit de transcripción in vitro T7 (con bajo contenido de ARN bicatenario) es un producto desarrollado mediante la selección de mutantes de la ARN polimerasa T7 y la optimización del sistema de reacción de transcripción. Utilizando ADN bicatenario lineal que contiene la secuencia promotora T7 como molde y NTP como sustratos, transcribe la secuencia de ADN posterior al promotor. Esto permite a los usuarios obtener de forma rápida y sencilla grandes cantidades de ARN con bajos niveles de ARN bicatenario. Este kit también puede utilizar nucleósidos modificados como sustratos para producir ARN marcado con biotina, colorantes o sustancias radiactivas, y ARN con capuchón utilizando estructuras tipo capuchón o similares como sustratos.
El kit incluye el nucleósido modificado N1-Me-pUTP, comúnmente utilizado para la transcripción. Este kit puede producir entre 150 y 200 μg de ARN por reacción y es apto para escalar la producción a nivel de miligramos. El ARN transcrito puede utilizarse para estudios de estructura y función del ARN, protección contra la ARNasa, hibridación de sondas, ARN antisentido y aplicaciones de ARN de interferencia (ARNi). También puede ser modificado mediante el sistema de modificación del virus vaccinia (HYJ231) y la 2'-O-metiltransferasa (HYJ232), y añadido mediante la polimerasa de poli(A) (HYJ233) para generar ARNm para aplicaciones posteriores, como la traducción in vitro y la transfección.
Componentes
| Componentes | Concentración | 50T |
| ATP | 100 mM | 100 μL |
| CTP | 100 mM | 100 μL |
| GTP | 100 mM | 100 μL |
| UTP | 100 mM | 100 μL |
| N1-Me-pUTP | 100 mM | 100 μL |
| 10× IVT Tampón 9 | / | 100 μL |
| Mezcla de enzimas (bajo contenido de ARN bicatenario) | / | 100 μL |
| Plantilla de control 1 | 0,5 μg/μL | 10 μL |
| LiCl | 5 M | 1,4 mL |
| DNasa I | 5 U/μL | 100 μL |
Almacenamiento
Conservar entre -25 y -15 °C. Válido por 1 año.


