Reactivo de transcripción in vitro T7 de alto rendimiento (termoestable) HYJ244
La ARN polimerasa termoestable T7 puede realizar la transcripción in vitro a temperaturas elevadas (50 °C). Utilizando ADN bicatenario lineal que contiene la secuencia promotora T7 como molde y NTP como sustratos, transcribe la secuencia de ADN posterior al promotor para producir ARN. La ARN polimerasa termoestable T7 también puede utilizar nucleósidos modificados como sustratos para producir ARN marcado con biotina, colorantes o sustancias radiactivas, y ARN con caperuza utilizando estructuras tipo caperuza o similares como sustratos. Las altas temperaturas ayudan a minimizar la formación de subproductos de ARN bicatenario y reducen la inmunogenicidad del ARN transcrito.
Este kit contiene el nucleósido modificado N1-Me-pUTP, de uso común para sus necesidades de transcripción. Este kit puede producir entre 150 y 200 μg de ARN por reacción y es apto para escalar la producción a nivel de miligramos. El ARN transcrito puede utilizarse para estudios de estructura y función del ARN, protección contra la ARNasa, hibridación de sondas, ARN antisentido y aplicaciones de ARN de interferencia (ARNi). También puede ser modificado mediante el sistema de modificación del virus vaccinia (HYJ231) y la 2'-O-metiltransferasa (HYJ232), y añadido mediante la polimerasa de poli(A) (HYJ233) para generar ARNm para aplicaciones posteriores como la traducción in vitro y la transfección.
Componentes
| Componentes | Concentración | 50T |
| ATP | 100 mM | 100 μL |
| CTP | 100 mM | 100 μL |
| GTP | 100 mM | 100 μL |
| UTP | 100 mM | 100 μL |
| N1-Me-pUTP | 100 mM | 100 μL |
| 10×Buffer IVT de alto rendimiento A | / | 100 μL |
| Mezcla de enzimas (termoestable) | / | 100 μL |
| Plantilla de control 1 | 0,5 μg/μL | 10 μL |
| LiCl | 5 M | 1,4 mL |
| DNasa I | 5 U/μL | 100 μL |
Almacenamiento
Conservar entre -25 y -15 °C. Válido por 1 año.


