Kit magnético universal de ADN/ARN viral HYD521
El kit magnético universal de ADN/ARN viral es adecuado para extraer ácido nucleico viral de sangre total o fluidos corporales libres de células (como suero, plasma, líquido cefalorraquídeo, hisopos nasales/faríngeos, líquido de lavado broncoalveolar, etc.). Este método utiliza tecnología de purificación con perlas magnéticas y no requiere extracción con fenol-cloroformo tóxico durante el proceso. Es seguro, no tóxico y rápido. El producto obtenido puede utilizarse directamente en PCR, qPCR, secuenciación de segunda generación y otros experimentos. Al utilizarse con instrumentos automatizados de extracción con perlas magnéticas, se puede lograr una extracción de alto rendimiento de ácidos nucleicos.
Información del producto
| Componentes | 48T |
| Solución de lisis y unión | 33 ml |
| Suspensión de perlas magnéticas | 1,1 mL |
| Amortiguador de lavado A | 40 ml |
| Tampón de lavado B | 80 ml |
| Solución de elución | 10 ml |
| Proteinasa K | 1,1 mL |
Condiciones de almacenamiento
La proteinasa K debe conservarse entre 2 y 8 °C, mientras que los demás ingredientes deben almacenarse a temperatura ambiente. Su vida útil es de 18 meses.
Descripción de la muestra
1. Tipos de muestras aplicables: sangre entera, suero, plasma, líquido cefalorraquídeo, hisopos nasales/faríngeos, líquido de lavado alveolar y otras muestras.
2. Almacenamiento y transporte de muestras: Las muestras pueden utilizarse para análisis inmediatamente o almacenarse a -70 °C o menos para su posterior análisis. El periodo de almacenamiento es de 6 meses. Debe evitarse la congelación y descongelación repetidas. Las muestras se transportan mediante cadena de frío.
3. Requisitos de congelación y descongelación: Congelar y descongelar rápidamente, evitando la congelación y descongelación repetidas.
Operación
Antes del experimento, compruebe si la solución presenta precipitación y si las microesferas magnéticas pueden volver a suspenderse.
1. Transfiera 200-300 μL de muestra a un tubo de centrífuga de 1,5 mL, añada 600 μL de solución de lisis y unión, 20 μL de proteinasa K y 20 μL de suspensión de perlas magnéticas en ese orden, y agite en vórtex a alta velocidad durante 30 segundos. Incube a 50 °C durante 5-7 minutos. Si el termostato no tiene función de oscilación, agite en vórtex 3 veces durante el período de incubación, cada vez durante 15 segundos.
2. Transfiera la solución a un soporte magnético de 1,5 mL para su separación magnética hasta que esté clara y transparente, y deseche la solución.
3. Añada 700 μL de tampón de lavado A, agite en vórtex durante 10 segundos para romper las perlas magnéticas y, a continuación, transfiera la muestra a un soporte magnético para la separación magnética hasta que la solución esté transparente y deseche la solución.
4. Añada 700 μL de tampón de lavado B, agite en vórtex durante 10 s para romper las perlas magnéticas, transfiera a un soporte magnético para la separación magnética hasta que la solución esté transparente y deseche la solución.
5. Añada de nuevo 700 μL de tampón de lavado B, agite en vórtex durante 10 s para romper las perlas magnéticas, transfiera a un soporte magnético para la separación magnética hasta que la solución esté transparente y deseche la solución.
6. Centrifugar brevemente para recoger las gotas adheridas a la pared del tubo, transferir a un soporte magnético para su clarificación y absorber el líquido residual. Dejar secar al aire durante 3-5 minutos.
Nota: Los residuos de etanol inhibirán las reacciones enzimáticas posteriores, por lo que asegúrese de que el etanol se evapore por completo durante el secado. No deje que el secado dure demasiado tiempo para evitar que afecte al efecto de elución posterior.
7. Añada 40-100 μL de solución de elución, agite en vórtex a alta velocidad durante 2-3 minutos para disgregar las microesferas magnéticas. Incube a 60℃ durante 5 minutos y, a continuación, agite en vórtex a alta velocidad durante 60 segundos.
8. Centrifugue inmediatamente para recoger el líquido de la tapa del tubo y transfiéralo al soporte magnético hasta que las microesferas magnéticas se hayan adsorbido por completo. A continuación, transfiera cuidadosamente el líquido a un nuevo tubo de centrífuga para obtener la solución de ácido nucleico.
9. La solución de ácido nucleico se puede almacenar a -20 °C para almacenamiento a corto plazo y a -80 °C para almacenamiento a largo plazo.
Notas
1. Las distintas soluciones tampón de este kit contienen sales de guanidina. Para su seguridad y salud, utilice bata de laboratorio y guantes desechables. Manipule el producto siguiendo las precauciones de seguridad establecidas. Evite el contacto de la solución tampón con la piel, los ojos y las mucosas. En caso de contacto, lave inmediatamente con abundante agua y busque atención médica.
2. Si la solución precipita, debe sumergirse en agua a 30 ℃ hasta que el precipitado se disuelva por completo antes de usarla.
3. Si la suspensión de perlas magnéticas está congelada, no la utilice.
4. Los distintos tampones de este kit contienen sales de guanidina. No utilice desinfectantes oxidantes como el hipoclorito de sodio para tratarlos, ya que se liberarían gases tóxicos y deberían desecharse como residuos médicos.
5. Es posible que queden microesferas magnéticas residuales durante la elución. Intente evitar inhalar las microesferas magnéticas al aspirar las muestras.