Tripsina recombinante-HYI212
La tripsina escinde específicamente los enlaces peptídicos C-terminales de la lisina y la arginina, lo que puede degradar Proteínas de unión intercelular. La secuencia de aminoácidos de la tripsina recombinante producida por Hyasen Biotech es idéntica a la de la tripsina derivada del páncreas porcino, y se produce mediante expresión recombinante en Escherichia coli. Puede reemplazar la extracción tradicional de tripsina para la digestión celular en vacunas, células madre, terapia con células inmunitarias, cribado de fármacos, anticuerpos y otros campos. La aprotinina, el inhibidor de tripsina de soja, etc., pueden inhibir la actividad de la tripsina de forma significativa. La tripsina recombinante posee las mismas propiedades que la tripsina extraída naturalmente. Este producto se fabrica en un taller con certificación GMP. No se utilizan materias primas de origen animal en la fermentación, purificación ni en los ingredientes finales. Asimismo, los procesos de producción y control de calidad están validados, lo que garantiza una alta consistencia entre lotes.
Componentes
| Componentes | Talla-1 | Talla 2 | Talla 3 | Talla 4 |
| Tripsina recombinante | 0,1 g | 1g | 10 g | 100 g |
Almacenamiento
La tripsina recombinante liofilizada en polvo debe almacenarse entre 2 y 8 °C. Es estable durante 24 meses. Tras disolverla en HCl 1 mM o HAC 50 mM, debe almacenarse entre -25 y -15 °C. No pierde actividad tras 10 ciclos repetidos de congelación y descongelación.
Especificación
| CAS | 9002-07-7 |
| CE | 3.4.21.4 |
| Personaje | Poder cristalino blanco o blanquecino |
| Peso molecular | 24 kDa |
| Punto isoeléctrico | 8.26 |
| Pureza (RP-HPLC) | β-tripsina ≥ 70,0% α-Tripsina ≤ 20,0% |
| Actividad específica | ≥3800,0 U/mg de proteína (BAEE) |
| Actividad de la tripsina recombinante | Potencia ≥2500,0 U/mg (BAEE) |
| Identificación | Púrpura |
| carga biológica | ≤300 UFC/ml |
| E. coli residuo de proteína de la célula huésped | ≤0,01% |
| E. coli residuo de ADN de la célula huésped | ≤10,0000 ng/mg |
| Contenido de endotoxinas (prueba LAL) | ≤20,0 UE/mg |
| Contenido de proteínas | 95,0%±10,0% |
Definición de unidad
25℃, pH 7.6, 3.2 ml de solución de reacción (1 cm de trayectoria óptica), una unidad de tripsina (U) se definió como una
aumento de 0,003 en el valor de absorbancia a 253 nm por hidrólisis enzimática de BAEE por minuto.
Control de calidad
- Actividad: Determinación de la actividad de la tripsina según la Farmacopea de la República Popular China, Volumen 4 (Edición 2020).
- Residuo de proteína de la célula huésped de E. coli: Kit ELISA. Farmacopea de la República Popular China Volumen 4 (Edición 2020) - Residuo de proteína de la célula huésped de E. coli (3412).
- Pureza de las proteínas: Farmacopea de la República Popular China Volumen 4 (Edición 2020) - Reglas generales para el método HPLC (0512).
- Carga biológica: Farmacopea de la República Popular China Volumen 4 (Edición 2020) - Reglas generales para la prueba de esterilidad (1101).
- Residuos de ADN de células huésped de E. coli: Farmacopea de la República Popular China Volumen 4 (Edición 2020) Residuos de ADN de células huésped (3407).
- Contenido de endotoxinas: Farmacopea de la República Popular China Volumen 4 (Edición 2020) - Reglas generales para la prueba LAL (1143).
Instrucciones
- Preparación de la solución: Tome la cantidad adecuada de tripsina según el contenido de proteína (calculado a partir de la actividad de potencia y la actividad proteica) de COA, y agregue solución de equilibrio HBSS (u otro tampón adecuado para la digestión celular. Si es necesario, agregue EDTA hasta una concentración final de 0-1 mM; lo ideal es no exceder los 2 mM). La concentración recomendada de tripsina es de aproximadamente 0,1-0,3 mg/mL (la concentración se ajusta según las diferentes células), y mezcle suavemente; este paso puede realizarse a temperatura ambiente.
- Utilice un filtro de 0,22 μm para filtrar la solución de tripsina y transfiérala a un recipiente estéril; este paso puede realizarse a temperatura ambiente.
- La solución de tripsina filtrada debe utilizarse directamente según se requiera el día (por ejemplo, añadiendo 1 ml a los frascos T25, digiriendo las células a 37 °C), y el líquido puede almacenarse a 2-8 °C durante 1-2 semanas.
- Almacenamiento a largo plazo: Si la solución de digestión de células recombinantes preparada necesita almacenarse durante un período prolongado, puede conservarse de forma estable a -25 a -15 °C durante 12 meses.
Uso del producto
Para cultivo celular
- Digestión de bloques de tejido, obtención de células primarias.
- Digestión por paso de células adherentes.
- Cultivo celular mediante el método de microportadores.
- Digestión suave de células madre.
- Terapia con células inmunitarias, etc.
Para proteína recombinante
- Producción de insulina recombinante.
- Secuenciación de proteínas, mapeo de péptidos.
- Procesos proteolíticos específicos, como la investigación en proteómica.
Ventaja del producto
- Sin origen animal: Producción recombinante, sin contaminación por virus exógenos, el proceso de producción no utiliza materias primas de origen animal.
- Alta pureza: Alta proporción de β-tripsina y pureza de la proteína.
- Mejor control de procesos: Bajo contenido de proteína de la célula huésped de E. coli, ADN de la célula huésped, carga microbiana, iones metálicos y endotoxinas.
- Calidad estable: La producción por lotes estable puede garantizar una producción por lotes continua; no hay diferencia entre lotes.
Notas
- Las altas concentraciones de sales inorgánicas tienen un efecto evidente sobre la actividad.
- Evite el contacto con otros productos proteicos.
- Por su seguridad y salud, utilice bata de laboratorio y guantes durante la operación.