RNasa III--HYJ235
Este producto proviene de una cepa de E. coli que contiene una fusión genética del gen de la ARNasa III de E. coli (rnc) y el gen que codifica la proteína de unión a maltosa (MBP). Esta exonucleasa específica escinde el ARN de doble cadena (dsRNA) y genera fragmentos de dsRNA de 18-25 pb con 5'-PO4 y voladizos de 3'-OH, 3'.
Componentes
| Componentes | 0.2KU | 1KU |
| RNasa III (2 U/μL) | 100 µL | 500 µL |
| 10 × Tampón | 1 ml | 1 ml |
| 10 × EDTA | 1 ml | 1 ml |
| MnCl2 | 1 ml | 1 ml |
| Libre de RNasa de glucógeno | 0,05 ml | 0,05 ml |
Almacenamiento
Almacenar a -25～-15℃, transportar con hielo seco.
Definición de unidad
Una unidad se refiere a la cantidad de enzima necesaria para degradar 1 μg de dsRNA a siRNA en un sistema de reacción de 50 μL a 37 °C durante 20 minutos. (Temperatura óptima de reacción: 37 °C)
Control de calidad
Pureza ≥95%, sin actividad de DNasa ni RNasa, sin actividad de exonucleasa.
Sistema de reacción y condición
| Componentes | Volumen |
| Agua libre de nucleasas | Hasta 100 µL |
| 10 × Tampón | 10 µL |
| ARN bicatenario | 10 µg |
| RNasa III | 10 µL |
| 10 × MnCl2 | 10 µL |
Tiempo de reacción: Incubar a 37 °C durante 1 hora.
Inactivación de la reacción:Añadir 10 µl de EDTA 10 × para detener la reacción. No inactivar por calor. Calentar
La inactivación reduce el rendimiento del siRNA.
Notas
- Por su seguridad y salud, utilice bata de laboratorio y guantes desechables.
- El volumen del sistema de reacción se puede aumentar o disminuir según las necesidades reales.