RNasa R HYJ412
La RNasa R (ribonucleasa R) es una ribonucleasa 3'-5' de la superfamilia RNR de Escherichia coli que escinde el ARN en dinucleótidos y trinucleótidos de forma secuencial desde el extremo 3' al extremo 5'. La RNasa R digiere casi todas las moléculas de ARN lineal, pero es menos sensible al ARN circular, las estructuras en lazo o el ARN de doble cadena con extremos 3' sobresalientes de menos de 7 nucleótidos. La RNasa R se utiliza comúnmente en estudios de expresión génica y empalme alternativo. Digiere el ARN lineal para enriquecer la presencia de circRNAs y ARN en lazo. La RNasa R escinde el ARN lineal para enriquecer la presencia de circRNAs, que se utilizan para construir bibliotecas de ADNc intrónico a partir de ARN total.
Componentes
| Componentes | 0,5 KU | 5 A |
| RNasa R (20 U/μL) | 25 µL | 250 μL |
| Tampón de reacción 10× | 1 mL | 10×1 mL |
Información del producto
| Propiedades del producto | líquido transparente |
| Fuente | E. coli |
| Definición de actividad | Una unidad de actividad (U) se define como la cantidad de enzima necesaria para convertir 1 μg de poli-r(A) en nucleótidos solubles en ácido en una reacción estándar a 37 °C en 10 minutos. |
| Temperatura óptima de reacción | 37℃ |
| búfer de almacenamiento | 50 mM Tris-HCl (pH 7,5 a 25 °C), 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 50 % glicerol, 0,1 % Triton® X-100 |
| Tampón de reacción 10× | 200 mM Tris-HCl (pH 8,20 a 25 ℃), 1 mM MgCl21 M KCl |
| Condiciones de almacenamiento | -25 ~ -18℃, evitar la congelación y descongelación repetidas. |
Control de calidad
1. Pureza (SDS-PAGE): ≥95%.
2. Residual Y.coli ADN: Ensayo de RT-qPCR utilizando 10 μL de RNasa R para ADNr 16S con un valor Ct de ≥35.
3. Actividad de endonucleasa: No se detectó degradación cuando se incubó 1 μg de dsRNA a 37 °C durante 4 horas en una reacción de 20 μL que contenía al menos 10 U de RNasa R.
4. Actividad de la DNasa: No se detectó degradación cuando se incubó 1 μg de ADN pUC19 a 37 °C durante 4 horas en una reacción de 10 μL que contenía al menos 10 U de RNasa R.
5. Ensayo funcional: La funcionalidad de la RNasa R se evaluó en una reacción que contenía 10 U de RNasa R y 3 μg de ARN total de células 293T. La abundancia de ARN se determinó mediante RT-qPCR. Los valores de ΔCt de los ARN lineales fueron ≥4,5 y los de los ARN circulares fueron ≤1, calculados con y sin digestión con RNasa R.