ARN polimerasa T7 HYJ211
La ARN polimerasa T7 es una ARN polimerasa dependiente de ADN derivada del bacteriófago T7. Posee una actividad de ARN polimerasa 5'→3' altamente específica. La ARN polimerasa T7 es altamente específica para el promotor T7 y puede sintetizar grandes cantidades de ARN utilizando la secuencia corriente abajo de dicho promotor como molde.
Componentes
| Componentes | 5KU | 50KU | 500KU | 5000KU |
| ARN polimerasa T7 (50 U/μL) | 0,1 mL | 1 mL | 10 ml | 100 ml |
| Amortiguador 10×HH T7 | 2 × 0,1 mL | 2 × 1 mL | 2 × 10 mL | 2 × 100 mL |
Almacenamiento
Transportar a temperaturas inferiores a 0 °C; almacenar entre -25 y -15 °C. Válido durante 24 meses.
Búfer de almacenamiento
50 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 20 mM β-ME, 1 mM EDTA, 50 % glicerol, 0,1 % (p/v) Triton X-100, pH 7,9 a 25 °C
Definición de actividad
Una unidad de actividad (U) se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la conversión de NTP a 1 nmol de PPi en un sistema de reacción estándar a 37 °C en 1 hora.
Control de calidad
1. Detección de residuos de endonucleasa: Se añadieron 50 U de esta enzima y 1 μg de ADN λ a un sistema de reacción de 50 μL y se incubó a 37 °C durante 16 horas. Las bandas de ADN en la electroforesis en gel de agarosa permanecieron inalteradas.
2. Detección de residuos de exonucleasa: Se añadieron 50 U de esta enzima y 1 μg de ADN digerido con λ-Hind III a un sistema de reacción de 50 μL y se incubó a 37 °C durante 16 horas. Las bandas de ADN en la electroforesis en gel de agarosa permanecieron inalteradas.
3. NickPlaza bursátil norteamericanaDetección de residuos: Se añadieron 50 U de esta enzima y 1 μg de ADN pBR322 a un sistema de reacción de 50 μL y se incubó a 37 °C durante 16 horas. Las bandas de ADN en la electroforesis en gel de agarosa permanecieron inalteradas.
4. Prueba de residuos de RNasa: Agregue 50 U de esta enzima y 1,6 μg de ARN MS2 a un sistema de reacción de 50 μL e incube a 37 °C durante 16 horas. Las bandas de ARN observadas en la electroforesis en gel de agarosa permanecen inalteradas.
5. Inactivación por calor: 75°C durante 10 minutos.