UNG HYA314 sensible a la temperatura
La UNG sensible a la temperatura es una enzima UNG termosensible obtenida por expresión recombinante en E. coli. Esta enzima cataliza la liberación de uracilo libre a partir de ADN monocatenario y bicatenario que contiene uracilo, y no presenta actividad contra el ARN. En comparación con las enzimas UNG convencionales derivadas de genes de E. coli, la UNG sensible a la temperatura tiene mayor actividad a bajas temperaturas (20 °C a 37 °C), es sensible a la temperatura y se inactiva fácilmente (50 °C), evitando así la degradación de los productos de amplificación que contienen dUTP a temperatura ambiente debido a la actividad residual que podría persistir tras la inactivación de la enzima UNG convencional. Por lo tanto, la UNG sensible a la temperatura no solo se adapta mejor a las reacciones de PCR anticontaminación, sino que también se ajusta perfectamente a los procedimientos de amplificación por RT-PCR y se puede aplicar a las reacciones de RT-PCR anticontaminación.
Componentes
| Componente | 100 U | 1000 U | 5000 U |
| UNG sensible a la temperatura de 1 U/µL | 100 µL | 1 mL | 5 ml |
Almacenamiento
Almacenar entre -25°C y -15°C.
Definición de unidad
Una unidad se define como la cantidad de enzima que degrada 1 µg de ADN monocatenario que contiene dU en 1 hora a 37 °C.
Control de calidad
1. Pureza de la electroforesis SDS-PAGE superior al 98%.
2. Actividad de degradación, variación entre lotes y estabilidad.
3. Ausencia de actividad nucleasa exógena.
Notas
1. La temperatura de reacción óptima de la UNG sensible a la temperatura es relativamente baja. La dosis de enzima y el tiempo de reacción se pueden optimizar en el rango de 20 ℃ a 37 ℃, de 0,1 a 0,5 U y de 5 a 10 min; y la enzima se puede inactivar durante el proceso de transcripción inversa.
2. Adecuado para su uso en PCR y RT-PCR como método anticontaminación.
3. Evite la congelación y descongelación repetidas y no lo exponga a un ambiente con grandes fluctuaciones de temperatura.
4. Los distintos genes que se van a amplificar presentan diferente eficiencia en la utilización de dUTP y distinta sensibilidad a la enzima UNG. Por lo tanto, si el uso del sistema UNG reduce la sensibilidad de detección, se debe ajustar y optimizar el sistema de reacción. Si necesita asistencia técnica, póngase en contacto con nuestra empresa.