Magnetiline universaalne viirus-DNA/RNA komplekt HYD521
Magnetiline universaalne viiruslik DNA/RNA komplekt sobib viiruslike nukleiinhapete ekstraheerimiseks täisverest või rakkudevabadest kehavedelikest (nt seerum, plasma, tserebrospinaalvedelik, nina-/neeluproovid, alveolaarne loputusvedelik jne). See meetod kasutab magnethelmestega puhastustehnoloogiat ja ekstraheerimisprotsessi ajal ei ole vaja toksilist fenoolkloroformi ekstraheerimist. See on ohutu, mittetoksiline ja kiire. Saadud produkti saab otse kasutada PCR-is, qPCR-is, teise põlvkonna sekveneerimises ja muudes katsetes. Magnethelmestega automatiseeritud ekstraheerimisinstrumentidega kasutamisel on võimalik saavutada nukleiinhapete suure läbilaskevõimega ekstraheerimine.
Tooteinfo
| Komponendid | 48T |
| Lüüs ja sidumislahus | 33 ml |
| Magnetiline helmeste suspensioon | 1,1 ml |
| Pesupuhver A | 40 ml |
| Pesupuhver B | 80 ml |
| Elueerimislahus | 10 ml |
| Proteinaas K | 1,1 ml |
Säilitamistingimused
Proteinaas K-d tuleks hoida temperatuuril 2–8 ℃ ja teisi koostisosi toatemperatuuril. Säilivusaeg on 18 kuud.
Näidise kirjeldus
1. Kohaldatavad proovitüübid: täisveri, seerum, plasma, tserebrospinaalvedelik, nina-/neeluproovid, alveolaarne loputusvedelik ja muud proovid.
2. Proovide säilitamine ja transport: Proove võib kohe testimiseks kasutada või säilitada temperatuuril -70 ℃ või madalamal. Säilitusaeg on 6 kuud. Korduvat külmutamist ja sulatamist tuleks vältida. Proove transporditakse külmaahela abil.
3. Külmutamise-sulatamise nõuded: Kiire külmutamine ja sulatamine, vältige korduvat külmutamist ja sulatamist.
Operatsioon
Enne katset kontrollige, kas lahuses on sadet ja kas magnethelmeid saab uuesti suspendeerida.
1. Kandke 200–300 μL proovi 1,5 ml tsentrifuugituubi, lisage järjestikku 600 μL lüüsi- ja sidumislahust, 20 μL proteinaas K-d ja 20 μL magnethelmeste suspensiooni ning segage suurel kiirusel 30 sekundit. Inkubeerige temperatuuril 50 ℃ 5–7 minutit. Kui termostaadil pole võnkefunktsiooni, segage inkubatsiooniperioodi jooksul 3 korda, iga kord 15 sekundit.
2. Viige lahus magnetilise eraldamise jaoks 1,5 ml magnetilisele alusele, kuni see on selge ja läbipaistev, ning visake see ära.
3. Lisage 700 μL pesupuhvrit A, segage magnethelmeste purustamiseks 10 sekundit keerissegistil ja seejärel viige lahus magnetilise eraldamise jaoks magnetilisele alusele, kuni see on selge, ja visake see ära.
4. Lisage 700 μL pesupuhvrit B, segage magnethelmeste purustamiseks 10 sekundit keerissegistil, viige lahus magnetilisele eraldajale, kuni see on selge, ja visake lahus ära.
5. Lisage uuesti 700 μL pesupuhvrit B, segage magnethelmeste purustamiseks 10 sekundit keerissegistiga, viige lahus magnetilisele alusele magnetiliseks eraldamiseks, kuni see on selge, ja visake lahus ära.
6. Tsentrifuugige lühidalt, et koguda tuubi seinale jäävad tilgad, viige selitamiseks magnetilisele alusele ja image järelejäänud vedelik. Kuivatage õhu käes 3–5 minutit.
Märkus: Etanoolijäägid pärsivad järgnevaid ensüümreaktsioone, seega veenduge, et etanool kuivamise ajal täielikult aurustuks. Ärge kuivatage liiga kaua, et vältida järgneva elueerimisefekti mõjutamist.
7. Lisage 40–100 μL elueerimislahust, segage suurel kiirusel 2–3 minutit, et magnethelmeste lagunemine toimuks. Inkubeerige 5 minutit temperatuuril 60 ℃ ja seejärel segage suurel kiirusel 60 sekundit.
8. Tsentrifuugige koheselt, et koguda vedelik katseklaasi korgist ja viia see magnetilisele alusele, kuni magnethelmed on täielikult adsorbeerunud. Seejärel viige vedelik ettevaatlikult uude tsentrifuugiklaasi, et saada nukleiinhappe lahus.
9. Nukleiinhappelahust võib lühiajaliselt säilitada temperatuuril –20 °C ja pikaajaliselt temperatuuril –80 °C.
Märkused
1. Selles komplektis olevad erinevad puhvrid sisaldavad guanidiini sooli. Teie ohutuse ja tervise huvides kandke palun laborikitlit ja ühekordseid kindaid. Ja käsitsege vastavalt ohutusnõuetele. Ärge laske puhvril kokku puutuda naha, silmade ja limaskestadega. Kui see peaks juhtuma, peske kohe rohke veega ja pöörduge arsti poole.
2. Kui lahus satub, tuleb seda enne kasutamist leotada 30 ℃ vees, kuni sade on täielikult lahustunud.
3. Kui magnethelmeste suspensioon on külmunud, ärge seda kasutage.
4. Selles komplektis olevad erinevad puhvrid sisaldavad guanidiini sooli. Ärge kasutage nende töötlemiseks oksüdeerivaid desinfitseerimisvahendeid, näiteks naatriumhüpokloriti, vastasel juhul eralduvad mürgised gaasid ja neid tuleb käidelda meditsiinijäätmetena.
5. Elueerimise ajal võib esineda jääkmagnetpärleid. Proovide aspireerimisel püüdke vältida magnetpärlite sissehingamist.