HYD521 Birus DNA/RNA Kit Magnetiko Unibertsala
Magnetic Universal Viral DNA/RNA Kit egokia da birusen azido nukleikoa odol osotik edo zelularik gabeko gorputz-fluidoetatik (hala nola seruma, plasma, likido zefalorrakideoa, sudur/faringeko hisopoak, albeoloen garbiketa-likidoa, etab.) ateratzeko. Metodo honek ale magnetikoen arazketa-teknologia erabiltzen du, eta ez da fenol kloroformo toxikorik behar erauzketa-prozesuan. Segurua, ez-toxikoa eta azkarra da. Lortutako produktua zuzenean erabil daiteke PCR, qPCR, bigarren belaunaldiko sekuentziazioan eta beste esperimentu batzuetan. Ale magnetikoen erauzketa-tresna automatizatuekin erabiltzen denean, azido nukleikoen erauzketa handikoa lor daiteke.
Produktuaren informazioa
| Osagaiak | 48T |
| Lisi eta lotura-soluzioa | 33 ml |
| Ale magnetikoen esekidura | 1,1 ml |
| Garbiketa-bufferra A | 40 ml |
| B garbiketa-bufferra | 80 ml |
| Eluzio-soluzioa | 10 ml |
| Proteinasa K | 1,1 ml |
Biltegiratze Baldintzak
Proteinasa K 2~8 ℃-tan gorde behar da eta gainerako osagaiak giro-tenperaturan. Iraupena 18 hilabetekoa da.
Laginaren deskribapena
1. Aplikagarriak diren lagin motak: odol osoa, seruma, plasma, likido zefalorrakideoa, sudur/faringeko frotisak, albeoloen garbiketa-likidoa eta beste lagin batzuk.
2. Laginen biltegiratzea eta garraioa: Laginak berehala erabil daitezke probak egiteko edo -70 ℃ edo gutxiagotan gorde daitezke probak egiteko. Biltegiratze-epea 6 hilabetekoa da. Saihestu behar da behin eta berriz izoztea eta desizoztea. Laginak hotz-katearen bidez garraiatzen dira.
3. Izozte-desizozte baldintzak: Izozte eta desizozte azkarra, saihestu izozte eta desizozte errepikatuak.
Operazioa
Esperimentua egin aurretik, egiaztatu disoluzioak prezipitaziorik duen eta ale magnetikoak berriro eseki daitezkeen.
1. Transferitu 200~300 μL lagin 1,5 mL-ko zentrifugazio-hodi batera, gehitu 600 μL Lisi eta Lotura Soluzio, 20 μL Proteinasa K eta 20 μL ale magnetikoen suspentsio sekuentzialki, eta irabiatu abiadura handian 30 segundoz. Inkubatu 50 ℃-tan 5~7 minutuz. Termostatoak oszilazio-funtziorik ez badu, irabiatu 3 aldiz inkubazio-aldian, bakoitza 15 segundoz.
2. Transferitu 1,5 mL-ko euskarri magnetiko batera bereizketa magnetikorako, disoluzioa garden eta garbi egon arte, eta bota disoluzioa.
3. Gehitu 700 μL A garbiketa-bufferraren, irabiatu 10 segundoz ale magnetikoak hausteko, eta ondoren, eraman euskarri magnetiko batera bereizketa magnetikorako, disoluzioa gardena izan arte, eta bota disoluzioa.
4. Gehitu 700 μL B garbiketa-bufferraren, irabiatu 10 segundoz ale magnetikoak hausteko, eraman euskarri magnetiko batera bereizketa magnetikorako disoluzioa gardena izan arte, eta bota disoluzioa.
5. Gehitu berriro 700 μL B garbiketa-bufferraren, irabiatu 10 segundoz ale magnetikoak hausteko, eraman euskarri magnetiko batera bereizketa magnetikorako disoluzioa gardena izan arte, eta bota disoluzioa.
6. Zentrifugatu laburki hodiaren horman dauden tantak biltzeko, eraman euskarri magnetiko batera argitzeko eta xurgatu hondar likidoa. Utzi airean lehortzen 3-5 minutuz.
Oharra: Etanol hondarrek ondorengo entzima-erreakzioak inhibituko dituzte, beraz, ziurtatu etanola guztiz lurruntzen dela lehortzean. Ez lehortu denbora luzez ondorengo eluzio-efektuan eraginik ez izateko.
7. Gehitu 40~100 μL eluzio-soluzio, zurrunbiloan irabiatu abiadura handian 2~3 minutuz ale magnetikoak hausteko. Inkubatu 60 ℃-tan 5 minutuz, eta ondoren zurrunbiloan irabiatu abiadura handian 60 segundoz.
8. Zentrifugazio berehalakoa hodiaren tapoiko likidoa biltzeko eta euskarri magnetikora eramateko, ale magnetikoak guztiz xurgatu arte. Ondoren, kontu handiz eraman likidoa zentrifugazio-hodi berri batera azido nukleikoaren disoluzioa lortzeko.
9. Azido nukleikoaren disoluzioa -20 °C-tan gorde daiteke epe laburrerako eta -80 °C-tan epe luzerako.
Oharrak
1. Kit honetako buffer ezberdinek guanidina gatzak dituzte. Zure segurtasunerako eta osasunerako, mesedez, erabili laborategiko bata eta botatzeko eskularruak. Eta maneiatu segurtasun neurri estandarren arabera. Ez utzi bufferra azalarekin, begiekin eta muki-mintzekin kontaktuan jartzen. Gertatzen bada, garbitu berehala ur askorekin eta bilatu medikuaren arreta.
2. Disoluzioak prezipitatu egiten badu, 30 ℃-ko uretan bainatu behar da prezipitatua guztiz disolbatu arte erabili aurretik.
3. Ale magnetikoen esekidura izoztuta badago, ez erabili.
4. Kit honetako hainbat bufferrek guanidina gatzak dituzte. Ez erabili desinfektatzaile oxidatzaileak, hala nola sodio hipokloritoa, horiek tratatzeko, bestela gas toxikoak askatuko baitira eta hondakin mediko gisa tratatu behar dira.
5. Baliteke ale magnetiko hondarrak egotea eluzioan zehar. Saiatu ale magnetikoak ez arnastea laginak xurgatzen dituzunean.