کیت مغناطیسی DNA/RNA ویروسی یونیورسال HYD521
کیت DNA/RNA ویروسی جهانی مغناطیسی برای استخراج اسید نوکلئیک ویروسی از خون کامل یا مایعات بدن بدون سلول (مانند سرم، پلاسما، مایع مغزی نخاعی، سواب بینی/حلق، مایع لاواژ آلوئولار و غیره) مناسب است. این روش از فناوری خالصسازی مهره مغناطیسی استفاده میکند و در طول فرآیند استخراج نیازی به استخراج فنل کلروفرم سمی نیست. این روش ایمن، غیرسمی و سریع است. محصول بهدستآمده را میتوان مستقیماً در PCR، qPCR، توالییابی نسل دوم و سایر آزمایشها استفاده کرد. در صورت استفاده با ابزارهای استخراج خودکار مهره مغناطیسی، میتوان به استخراج با توان عملیاتی بالای اسیدهای نوکلئیک دست یافت.
اطلاعات محصول
| قطعات | ۴۸تی |
| محلول لیز و اتصال | ۳۳ میلیلیتر |
| سیستم تعلیق مهره مغناطیسی | ۱.۱ میلیلیتر |
| بافر شستشو A | ۴۰ میلیلیتر |
| بافر شستشو B | ۸۰ میلیلیتر |
| محلول شستشو | ۱۰ میلیلیتر |
| پروتئیناز K | ۱.۱ میلیلیتر |
شرایط نگهداری
پروتئیناز K باید در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد و سایر ترکیبات باید در دمای اتاق نگهداری شوند. عمر مفید آن ۱۸ ماه است.
شرح نمونه
۱. انواع نمونههای قابل استفاده: خون کامل، سرم، پلاسما، مایع مغزی نخاعی، سواب بینی/حلق، مایع شستشوی آلوئولار و سایر نمونهها.
۲. نگهداری و حمل و نقل نمونه: نمونهها را میتوان بلافاصله برای آزمایش استفاده کرد یا برای آزمایش در دمای -۷۰ درجه سانتیگراد یا کمتر نگهداری کرد. مدت نگهداری ۶ ماه است. از انجماد و ذوب مکرر باید اجتناب شود. نمونهها با رعایت زنجیره سرد حمل میشوند.
۳. الزامات انجماد-ذوب: انجماد و ذوب سریع، از انجماد و ذوب مکرر خودداری کنید.
عملیات
قبل از آزمایش، بررسی کنید که آیا محلول رسوب کرده است و آیا میتوان دانههای مغناطیسی را دوباره به حالت تعلیق درآورد.
۱. ۲۰۰ تا ۳۰۰ میکرولیتر نمونه را به یک لوله سانتریفیوژ ۱.۵ میلیلیتری منتقل کنید، ۶۰۰ میکرولیتر محلول لیزکننده و اتصالدهنده، ۲۰ میکرولیتر پروتئیناز K و ۲۰ میکرولیتر سوسپانسیون مهره مغناطیسی را به ترتیب اضافه کنید و به مدت ۳۰ ثانیه با سرعت بالا ورتکس کنید. به مدت ۵ تا ۷ دقیقه در دمای ۵۰ درجه سانتیگراد انکوبه کنید. اگر ترموستات عملکرد نوسانی ندارد، در طول دوره انکوباسیون ۳ بار و هر بار به مدت ۱۵ ثانیه ورتکس کنید.
۲. برای جداسازی مغناطیسی، محلول را به یک پایه مغناطیسی ۱.۵ میلیلیتری منتقل کنید تا شفاف و زلال شود و سپس محلول را دور بریزید.
۳. ۷۰۰ میکرولیتر بافر شستشوی A اضافه کنید، به مدت ۱۰ ثانیه ورتکس کنید تا دانههای مغناطیسی از هم جدا شوند و سپس برای جداسازی مغناطیسی به یک پایه مغناطیسی منتقل کنید تا محلول شفاف شود و محلول را دور بریزید.
۴. ۷۰۰ میکرولیتر بافر شستشوی B اضافه کنید، به مدت ۱۰ ثانیه ورتکس کنید تا دانههای مغناطیسی شکسته شوند، برای جداسازی مغناطیسی به یک پایه مغناطیسی منتقل کنید تا محلول شفاف شود و محلول را دور بریزید.
۵. دوباره ۷۰۰ میکرولیتر بافر شستشوی B اضافه کنید، به مدت ۱۰ ثانیه ورتکس کنید تا دانههای مغناطیسی شکسته شوند، برای جداسازی مغناطیسی به یک پایه مغناطیسی منتقل کنید تا محلول شفاف شود و محلول را دور بریزید.
۶. برای جمعآوری قطرات روی دیواره لوله، سانتریفیوژ کوتاهی انجام دهید، برای شفافسازی به یک پایه مغناطیسی منتقل کنید و مایع باقیمانده را جذب کنید. به مدت ۳ تا ۵ دقیقه در هوا خشک کنید.
توجه: باقیمانده اتانول واکنشهای آنزیمی بعدی را مهار میکند، بنابراین مطمئن شوید که اتانول هنگام خشک کردن کاملاً تبخیر شده است. برای جلوگیری از تأثیر بر اثر شویش بعدی، خشک کردن را خیلی طولانی نکنید.
۷. ۴۰ تا ۱۰۰ میکرولیتر محلول الوشن اضافه کنید، به مدت ۲ تا ۳ دقیقه با سرعت بالا ورتکس کنید تا دانههای مغناطیسی شکسته شوند. به مدت ۵ دقیقه در دمای ۶۰ درجه سانتیگراد انکوبه کنید، سپس به مدت ۶۰ ثانیه با سرعت بالا ورتکس کنید.
۸. سانتریفیوژ فوری برای جمعآوری مایع از درب لوله و انتقال آن به قفسه مغناطیسی تا زمانی که دانههای مغناطیسی کاملاً جذب شوند. سپس مایع را با دقت به یک لوله سانتریفیوژ جدید منتقل کنید تا محلول اسید نوکلئیک به دست آید.
۹. محلول اسید نوکلئیک را میتوان برای نگهداری کوتاهمدت در دمای ۲۰- درجه سانتیگراد و برای نگهداری بلندمدت در دمای ۸۰- درجه سانتیگراد نگهداری کرد.
یادداشتها
۱. بافرهای مختلف موجود در این کیت حاوی نمکهای گوانیدین هستند. برای ایمنی و سلامت خود، لطفاً روپوش آزمایشگاهی و دستکش یکبار مصرف بپوشید. و طبق اقدامات احتیاطی استاندارد ایمنی با آنها کار کنید. اجازه ندهید بافر با پوست، چشمها و غشاهای مخاطی تماس پیدا کند. در صورت تماس، لطفاً فوراً با آب فراوان بشویید و به پزشک مراجعه کنید.
۲. اگر محلول رسوب کرد، قبل از استفاده باید در آب ۳۰ درجه سانتیگراد قرار داده شود تا رسوب کاملاً حل شود.
۳. اگر سوسپانسیون مهره مغناطیسی یخ زده است، از آن استفاده نکنید.
۴. بافرهای مختلف موجود در این کیت حاوی نمکهای گوانیدین هستند. از ضدعفونیکنندههای اکسیدکننده مانند هیپوکلریت سدیم برای تصفیه آنها استفاده نکنید، در غیر این صورت گازهای سمی آزاد میشوند و باید به عنوان زبالههای پزشکی با آنها برخورد شود.
۵. ممکن است در حین شستشو، دانههای مغناطیسی باقی بمانند. هنگام آسپیراسیون نمونهها، سعی کنید از استنشاق دانههای مغناطیسی خودداری کنید.