Magneettinen universaali virus-DNA/RNA-pakkaus HYD521
Magneettinen Universal Viral DNA/RNA -pakkaus soveltuu virusnukleiinihapon eristämiseen kokoverestä tai soluttomista kehon nesteistä (kuten seerumista, plasmasta, aivo-selkäydinnesteestä, nenän/nielun näytteistä, keuhkorakkuloiden huuhtelunesteestä jne.). Tässä menetelmässä käytetään magneettihelmiin perustuvaa puhdistustekniikkaa, eikä eristysprosessin aikana tarvita myrkyllistä fenolikloroformiuuttoa. Se on turvallinen, myrkytön ja nopea. Saatua tuotetta voidaan käyttää suoraan PCR:ssä, qPCR:ssä, toisen sukupolven sekvensoinnissa ja muissa kokeissa. Käytettäessä magneettihelmiin perustuvia automaattisia uuttolaitteita voidaan saavuttaa nukleiinihappojen suuritehoinen uutto.
Tuotetiedot
| Komponentit | 48T |
| Lyysi- ja sitoutumisliuos | 33 ml |
| Magneettinen helmirusitus | 1,1 ml |
| Pesupuskuri A | 40 ml |
| Pesupuskuri B | 80 ml |
| Eluointiliuos | 10 ml |
| Proteinaasi K | 1,1 ml |
Säilytysolosuhteet
Proteinaasi K:ta tulee säilyttää 2–8 ℃:ssa ja muita ainesosia huoneenlämmössä. Säilyvyysaika on 18 kuukautta.
Esimerkkikuvaus
1. Sovellettavat näytetyypit: kokoveri, seerumi, plasma, aivo-selkäydinneste, nenä-/nielunäytteet, alveolaarinen huuhteluneste ja muut näytteet.
2. Näytteiden säilytys ja kuljetus: Näytteitä voidaan käyttää testaukseen välittömästi tai säilyttää -70 ℃:ssa tai alemmassa lämpötilassa testausta varten. Säilytysaika on 6 kuukautta. Toistuvaa pakastamista ja sulattamista tulee välttää. Näytteet kuljetetaan kylmäketjussa.
3. Pakastus-sulatusvaatimukset: Nopea pakastus ja sulatus, vältä toistuvaa pakastusta ja sulatusta.
Käyttö
Ennen koetta tarkista, onko liuoksessa sakkaa ja voidaanko magneettihelmet suspendoida uudelleen.
1. Siirrä 200–300 μl näytettä 1,5 ml:n sentrifugiputkeen, lisää 600 μl lysis- ja sitoutumisliuosta, 20 μl proteinaasi K:ta ja 20 μl magneettihelmisuspensiota peräkkäin ja vorteksoi suurella nopeudella 30 sekuntia. Inkuboi 50 ℃:ssa 5–7 minuuttia. Jos termostaatissa ei ole oskillointitoimintoa, vorteksoi kolme kertaa inkubointijakson aikana, kerrallaan 15 sekuntia.
2. Siirrä 1,5 ml:n magneettitelineeseen magneettista erottelua varten, kunnes liuos on kirkasta ja läpinäkyvää, ja hävitä liuos.
3. Lisää 700 μl pesupuskuria A, sekoita vortekslaitteessa 10 sekuntia magneettisten helmien rikkomiseksi ja siirrä sitten magneettitelineeseen magneettista erottelua varten, kunnes liuos on kirkasta, ja hävitä liuos.
4. Lisää 700 μl pesupuskuria B, sekoita vorteksilla 10 sekuntia magneettisten helmien rikkomiseksi, siirrä magneettitelineeseen magneettista erottelua varten, kunnes liuos on kirkas, ja hävitä liuos.
5. Lisää uudelleen 700 μl pesupuskuria B, sekoita vorteksissa 10 sekuntia magneettihelmien rikkomiseksi, siirrä magneettitelineeseen magneettista erottelua varten, kunnes liuos on kirkas, ja hävitä liuos.
6. Sentrifugoi lyhyesti kerätäksesi pisarat putken seinämään, siirrä kirkastettavaksi magneettitelineeseen ja imeytä jäännösneste. Ilmakuivaa 3–5 minuuttia.
Huomautus: Etanolijäämät estävät seuraavia entsyymireaktioita, joten varmista, että etanoli haihtuu kokonaan kuivumisen aikana. Älä kuivaa liian kauan, jotta se ei vaikuta myöhempään eluointivaikutukseen.
7. Lisää 40–100 μl eluointiliuosta, vorteksoi suurella nopeudella 2–3 minuuttia magneettisten helmien rikkomiseksi. Inkuboi 60 ℃:ssa 5 minuuttia ja vorteksoi sitten suurella nopeudella 60 sekuntia.
8. Kerää neste putken korkista sentriföimällä pikaisesti ja siirrä se magneettitelineeseen, kunnes magneettihelmet ovat täysin adsorboituneet. Siirrä sitten neste varovasti uuteen sentrifugiputkeen nukleiinihappoliuoksen saamiseksi.
9. Nukleiinihappoliuosta voidaan säilyttää lyhytaikaisessa säilytyksessä -20 °C:ssa ja pitkäaikaisessa säilytyksessä -80 °C:ssa.
Muistiinpanoja
1. Tämän pakkauksen eri puskurit sisältävät guanidiinisuoloja. Turvallisuutesi ja terveytesi vuoksi käytä laboratoriotakkia ja kertakäyttökäsineitä. Käsittele pakkauksia turvallisuusmääräysten mukaisesti. Älä anna puskurin joutua kosketuksiin ihon, silmien tai limakalvojen kanssa. Jos näin käy, pese välittömästi runsaalla vedellä ja hakeudu lääkärin hoitoon.
2. Jos liuos saostuu, se on liotettava 30 ℃:n vedessä, kunnes sakka on täysin liuennut ennen käyttöä.
3. Jos magneettihelmisuspensio on jäätynyt, älä käytä sitä.
4. Tämän pakkauksen eri puskuriliuokset sisältävät guanidiinisuoloja. Älä käytä niiden käsittelyyn hapettavia desinfiointiaineita, kuten natriumhypokloriittia, muuten vapautuu myrkyllisiä kaasuja ja ne on käsiteltävä lääketieteellisenä jätteenä.
5. Eluoinnin aikana saattaa olla jäljellä magneettihelmiä. Vältä magneettihelmien hengittämistä näytteitä imettäessäsi.