Prémélange PCR 2× (sans colorant) HYA443
Le mélange maître PCR est une solution prémélangée pour PCR classique, prête à l'emploi, contenant de la Taq ADN polymérase, un mélange de dNTP et du MgCl₂.2et un tampon optimisé. Lors de la réaction, seuls l'amorce et la matrice sont nécessaires à l'amplification, ce qui simplifie considérablement les étapes expérimentales. Ce produit contient d'excellents stabilisateurs et se conserve 3 mois à 4 °C. Le produit PCR présente une protubérance 3'-dA et peut être facilement cloné dans un vecteur T.
Composants
| Composants | Taille-1 | Taille 2 | Taille 3 |
| Prémélange PCR 2× (sans colorant) | 5 mL | 1 mL × 15 | 1 mL × 50 |
Stockage
À conserver à -20°C pendant 2 ans.
Instructions
1. Système réactionnel
| Composants | Volume |
| Prémélange PCR 2× (sans colorant) | 25 µL |
| Amorce directe (10 μM) | 2 µL |
| Amorce inverse (10 μM) | 2 µL |
| Modèle d'ADN* | Variable |
| ddH2LE | Jusqu'à 50 µL |
*Utilisation du modèle : 50 à 200 ng d'ADN génomique ; 0,1 à 10 ng d'ADN plasmidique
2. Programme de réaction
| Étape | Température | Temps | Cycles |
| Dénaturation initiale | 94 °C | 5 min | 1 |
| Dénaturation | 94 °C | 30 s | 35 |
| recuit | 50-60 °C | 30 s | |
| Extension | 72 °C | 30-60 s/ko | |
| Prolongation finale | 72 °C | 10 min | 1 |
| Prise | 4 °C | - | 1 |
1. Mg2+ Concentration : Ce produit contient 3 mM de MgCl₂2, convient à la plupart des réactions PCR.
2. Température d'hybridation : Veuillez vous référer à la valeur théorique de Tm des amorces. La température d'hybridation peut être inférieure de 2 à 5 °C à la valeur théorique de l'amorce.
3. Temps d'extension : Pour l'identification moléculaire, 30 s/kb sont recommandés. Pour le clonage de gènes, 60 s/kb sont recommandés.
Notes
1. Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter une blouse de laboratoire et des gants jetables pendant la manipulation.
2. Il est destiné UNIQUEMENT à la recherche !