2× PCR Super Mix HYA441
Le Super Mix PCR 2× est un prémélange optimisé contenant de l'ADN polymérase, des dNTP et du MgCl₂.2Ce produit contient du KCl et d'autres stabilisants. Il suffit d'ajouter des amorces et des matrices pour réaliser l'amplification. Il peut utiliser un ADN génomique complexe comme matrice pour amplifier un fragment cible de 5 kb ou une matrice simple, comme l'ADN lambda, pour amplifier un fragment cible de 10 kb. Il convient aux réactions PCR conventionnelles, à la construction de vecteurs et à d'autres applications.
Composants
| Composants | Taille-1 | Taille 2 | Taille 3 |
| Super Mix PCR 2× | 5 mL | 1 mL × 15 | 1 mL × 100 |
Propriétés
| Spécification | Fonction |
| Activité exonucléase 5'-3' | Non |
| Activité exonucléase 3'-5' | Oui |
| Fidélité | 6X Taq |
| Fin de produit | Extrémité émoussée |
Stockage
À conserver à -20°C.
Instructions
1. Système réactionnel
| Composants | Système de réaction de 25 µL | Système de réaction de 50 µL |
| Super Mix PCR 2× | 12,5 µL | 25 µL |
| Amorce directe (10 μM) | 0,5 µL | 1 µL |
| Amorce inverse (10 μM) | 0,5 µL | 1 µL |
| Modèle d'ADN* | Variable | Variable |
| Eau sans nucléase | Jusqu'à 25 µL | Jusqu'à 50 µL |
*Remarque : La concentration optimale de la réaction varie selon la matrice d’ADN. Veuillez vous référer aux principes de base de la PCR ci-dessous.
2. Programme de réaction
| Étape | Température | Temps | Cycles |
| Dénaturation initiale | 98 °C | 45 s* | 1 |
| Dénaturation | 98 °C | 10 s | 30 |
| recuit | 55-65 °C | 30 s | |
| Extension | 72℃ | 20-30 s/ko | |
| Prolongation finale | 72℃ | 5 min | 1 |
| Prise | 4-12 °C | - | 1 |
*Remarque : Dans le cas de matrices d’ADN de haute complexité, le temps de prédénaturation doit être prolongé jusqu’à 3 minutes pour une dénaturation complète.


