DNase I HYJ234
La DNase I (désoxyribonucléase I) est une endodésoxyribonucléase qui digère l'ADN simple brin ou double brin. Elle reconnaît et clive les liaisons phosphodiester, générant des monodésoxynucléotides ou des oligodésoxynucléotides simple brin ou double brin possédant un groupe phosphate à l'extrémité 5' et un groupe hydroxyle à l'extrémité 3'. L'activité de la DNase I est dépendante du calcium.2+et peut être activé par des ions métalliques divalents tels que le Mn2+et Zn2+. 5 mM Ca2+protège l'enzyme de l'hydrolyse. En présence de Mg2+L'enzyme peut alors reconnaître et cliver aléatoirement n'importe quel site sur l'un ou l'autre brin d'ADN. En présence de Mn2+, elle peut reconnaître simultanément les deux brins d'ADN et les cliver à des sites presque identiques, formant des fragments d'ADN à extrémités franches ou collantes avec un ou deux nucléotides en saillie.
Composants
| Composants | 0,1KDANS | 0,5KDANS | 5KU | 50À |
| DNase I, sans RNase (5 U/µL) | 0,02 mL | 0,1 mL | 1 mL | 10 mL |
| Tampon DNase I 10× | 1 mL | 1 mL | 5×1 mL | 5 × 10 mL |
Stockage
À conserver entre -25 et -15 °C. Valable 2 ans.
tampon de stockage
Tris-HCl 10 mM, CaCl₂ 2 mM2, 50 % de glycérol, pH 7,6 à 25 °C.
Définition de l'activité
Une unité (U) d'activité fait référence à la quantité d'enzyme nécessaire pour dégrader complètement 1 μg d'ADN pBR322 à 37 °C en 10 minutes.
Contrôle de qualité
1. Activité RNase : 5 U de ce produit et 1,6 μg d'ARN MS2 ont réagi à 37 °C pendant 4 heures ; la bande électrophorétique de l'ARN n'a pas changé.
2.Endotoxine :Test LAL, Pharmacopée chinoise édition 2020, Partie IV, Test de limite de gel, Règles générales (1143), teneur en endotoxines bactériennes ≤ 10 UE/mg.