Kit ELISA pour ARN double brin (ARNdb) HYJ521
Ce kit est un test immuno-enzymatique (ELISA) couplé au système biotine-streptavidine, permettant la mesure quantitative d'ARNdb de plus de 40 paires de bases (pb), quelle que soit sa séquence. La plaque est pré-enduite d'anticorps anti-ARNdb. L'ARNdb présent dans l'échantillon est ajouté et se lie aux anticorps déposés sur les puits. Ensuite, un anticorps anti-ARNdb biotinylé est ajouté et se lie à l'ARNdb de l'échantillon. Après lavage, la streptavidine couplée à la peroxydase (HRP) est ajoutée et se lie à l'anticorps anti-ARNdb biotinylé. Après incubation, la HRP-streptavidine non liée est éliminée par lavage. Une solution de substrat TMB est ensuite ajoutée et catalysée par la HRP pour produire un produit de couleur bleue qui devient jaune après ajout d'une solution d'arrêt acide. L'intensité de la coloration jaune est proportionnelle à la quantité d'ARNdb cible capturée sur la plaque. L'absorbance est mesurée à 450 nm.
Composants
| Composants | 48 T | 96 T |
| Microplaque ELISA | 8×6 | 8×12 |
| Anticorps de détection biotinylé (100x) | 60 μL | 120 μL |
| HRP-streptavidine (100x) | 60 μL | 120 μL |
| Tampon de dilution | 15 mL | 30 mL |
| solution de substrat TMB | 6 mL | 12 mL |
| Solution d'arrêt | 3 mL | 6 mL |
| Tampon de lavage concentré (20x) | 20 mL | 40 mL |
| Standard (UTP, 1 ng/μL) | 7,5 μL | 15 μL |
| Standard (pUTP, 1 ng/μL) | 7,5 μL | 15 μL |
| Standard (N1-Me-pUTP, 1 ng/μL) | 7,5 μL | 15 μL |
| Standard (5-OMe-UTP, 1 ng/μL) | 7,5 μL | 15 μL |
| tampon STE | 25 mL | 50 mL |
| Scelleuse de plaques | 2 pièces | 4 pièces |
Stockage
1. Pour le kit non utilisé : Le kit complet peut être conservé entre 2 et 8 °C. Pour une conservation optimale, il convient d’éviter toute exposition à une lumière intense.
2. Pour le kit utilisé : Une fois la microplaque ouverte, veuillez recouvrir les puits non utilisés avec le scellant pour plaques et remettre dans le sachet en aluminium contenant le sachet déshydratant, sceller le sachet en aluminium et remettre à 2~8℃ dès que possible après utilisation.
3. Les autres réactifs doivent être ramenés à une température de 2 à 8 °C dès que possible après utilisation.
Matériel supplémentaire requis
1. Lecteur de microplaques avec filtre 450±10 nm (idéalement capable de détecter aux longueurs d'onde de 450 et 650 nm).
2. Agitateur de microplaques.
3. Embouts et tubes à centrifuger sans RNase.