Réactif de transcription in vitro T7 à haut rendement (faible dsRNA) HYJ243
Le kit de transcription in vitro T7 (faible teneur en ARNdb) est un produit issu du criblage de mutants de l'ARN polymérase T7 et de l'optimisation du système de réaction de transcription. Utilisant un ADN double brin linéaire contenant la séquence promotrice T7 comme matrice et des NTP comme substrats, il transcrit la séquence d'ADN en aval du promoteur. Ceci permet aux utilisateurs d'obtenir rapidement et facilement de grandes quantités d'ARN produit avec de faibles niveaux d'ARNdb. Ce kit peut également utiliser des nucléosides modifiés comme substrats pour produire de l'ARN marqué à la biotine, à des colorants ou à des substances radioactives, ainsi que de l'ARN coiffé en utilisant des structures de coiffe ou de type coiffe comme substrats.
Ce kit inclut le nucléoside modifié N1-Me-pUTP, couramment utilisé pour la transcription. Il permet de produire 150 à 200 µg d'ARN par réaction et est adapté à une production à plus grande échelle, jusqu'à des quantités de l'ordre du milligramme. L'ARN transcrit peut être utilisé pour des études de structure et de fonction de l'ARN, la protection contre les RNases, l'hybridation de sondes, la synthèse d'ARN antisens et les applications d'ARN interférent (ARNi). Il peut également être coiffé à l'aide du système de coiffage du virus de la vaccine (HYJ231) et de la 2'-O-méthyltransférase (HYJ232), puis polyadénylé à l'aide de la poly(A) polymérase (HYJ233) afin de générer de l'ARNm pour des applications en aval telles que la traduction in vitro et la transfection.
Composants
| Composants | Concentration | 50T |
| ATP | 100 mM | 100 μL |
| CTP | 100 mM | 100 μL |
| GTP | 100 mM | 100 μL |
| UTP | 100 mM | 100 μL |
| N1-Me-pUTP | 100 mM | 100 μL |
| Tampon 10×IVT 9 | / | 100 μL |
| Mélange enzymatique (faible teneur en ARNdb) | / | 100 μL |
| Modèle de contrôle 1 | 0,5 μg/μL | 10 μL |
| LiCl | 5 M | 1,4 mL |
| DNase I | 5 U/μL | 100 μL |
Stockage
À conserver entre -25 et -15 °C. Valable 1 an.


