Kit magnétique universel pour ADN/ARN viral HYD521
Le kit universel magnétique d'extraction d'ADN/ARN viral est adapté à l'extraction d'acides nucléiques viraux à partir de sang total ou de fluides corporels acellulaires (sérum, plasma, liquide céphalo-rachidien, écouvillons nasopharyngés, liquide de lavage broncho-alvéolaire, etc.). Cette méthode utilise la technologie de purification par billes magnétiques et ne nécessite aucune extraction au phénol-chloroforme, un réactif toxique. Elle est sûre, non toxique et rapide. Le produit obtenu peut être utilisé directement pour la PCR, la qPCR, le séquençage de deuxième génération et d'autres expériences. Associé à des automates d'extraction par billes magnétiques, ce kit permet une extraction à haut débit d'acides nucléiques.
Informations sur le produit
| Composants | 48T |
| Solution de lyse et de liaison | 33 mL |
| Suspension de billes magnétiques | 1,1 mL |
| Tampon de lavage A | 40 mL |
| Tampon de lavage B | 80 mL |
| Solution d'élution | 10 mL |
| Protéinase K | 1,1 mL |
Conditions de stockage
La protéinase K doit être conservée entre 2 et 8 °C, et les autres ingrédients à température ambiante. Sa durée de conservation est de 18 mois.
Exemple de description
1. Types d'échantillons applicables : sang total, sérum, plasma, liquide céphalo-rachidien, écouvillons nasaux/pharyngés, liquide de lavage alvéolaire et autres échantillons.
2. Conservation et transport des échantillons : Les échantillons peuvent être utilisés immédiatement pour les analyses ou conservés à -70 °C ou moins en vue d’analyses ultérieures. La durée de conservation est de 6 mois. Les cycles de congélation-décongélation répétés sont à éviter. Le transport des échantillons s’effectue dans le respect de la chaîne du froid.
3. Exigences de congélation-décongélation : Congélation et décongélation rapides, éviter les cycles répétés de congélation et de décongélation.
Opération
Avant l'expérience, vérifiez si la solution présente un précipité et si les billes magnétiques peuvent être remises en suspension.
1. Transférer 200 à 300 μL d'échantillon dans un tube à centrifuger de 1,5 mL. Ajouter successivement 600 μL de solution de lyse et de liaison, 20 μL de protéinase K et 20 μL de suspension de billes magnétiques. Vortexer à vitesse maximale pendant 30 secondes. Incuber à 50 °C pendant 5 à 7 minutes. Si le thermostat ne possède pas de fonction d'oscillation, vortexer 3 fois pendant 15 secondes à chaque fois.
2. Transférer dans un support magnétique de 1,5 mL pour séparation magnétique jusqu'à ce que la solution soit claire et transparente, puis jeter la solution.
3. Ajouter 700 μL de tampon de lavage A, vortexer pendant 10 secondes pour briser les billes magnétiques, puis transférer sur un support magnétique pour séparation magnétique jusqu'à ce que la solution soit claire, et jeter la solution.
4. Ajouter 700 μL de tampon de lavage B, vortexer pendant 10 s pour briser les billes magnétiques, transférer sur un support magnétique pour séparation magnétique jusqu'à ce que la solution soit claire, puis jeter la solution.
5. Ajouter à nouveau 700 μL de tampon de lavage B, vortexer pendant 10 s pour briser les billes magnétiques, transférer sur un support magnétique pour séparation magnétique jusqu'à ce que la solution soit claire, puis jeter la solution.
6. Centrifuger brièvement pour recueillir les gouttelettes sur la paroi du tube, transférer sur un support magnétique pour clarification et absorber le liquide résiduel. Sécher à l'air libre pendant 3 à 5 minutes.
Remarque : Les résidus d’éthanol inhibent les réactions enzymatiques suivantes ; assurez-vous donc que l’éthanol s’évapore complètement lors du séchage. Ne prolongez pas le séchage afin de ne pas perturber l’élution ultérieure.
7. Ajouter 40 à 100 µL de solution d'élution, vortexer à vitesse élevée pendant 2 à 3 min pour dissocier les billes magnétiques. Incuber à 60 °C pendant 5 min, puis vortexer à vitesse élevée pendant 60 s.
8. Centrifuger immédiatement pour recueillir le liquide du bouchon du tube et le transférer sur le support magnétique jusqu'à adsorption complète des billes magnétiques. Transférer ensuite délicatement le liquide dans un nouveau tube à centrifuger pour obtenir la solution d'acide nucléique.
9. La solution d'acide nucléique peut être conservée à -20°C pour un stockage à court terme et à -80°C pour un stockage à long terme.
Notes
1. Les différents tampons contenus dans ce kit contiennent des sels de guanidine. Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter une blouse de laboratoire et des gants jetables. Manipulez-les en respectant les consignes de sécurité. Évitez tout contact du tampon avec la peau, les yeux et les muqueuses. En cas de contact, rincez immédiatement et abondamment à l'eau et consultez un médecin.
2. Si la solution précipite, elle doit être baignée dans de l'eau à 30 °C jusqu'à ce que le précipité soit complètement dissous avant utilisation.
3. Ne pas utiliser la suspension de billes magnétiques si elle est congelée.
4. Les différents tampons contenus dans ce kit contiennent des sels de guanidine. Ne pas utiliser de désinfectants oxydants tels que l'hypochlorite de sodium pour les traiter, car cela entraînerait le dégagement de gaz toxiques et leur élimination en tant que déchets médicaux.
5. Des billes magnétiques résiduelles peuvent subsister après l'élution. Évitez d'inhaler ces billes lors de l'aspiration des échantillons.