RNase III--HYJ235
Ce produit provient d'une souche d'E. coli contenant une fusion génétique du gène de la RNase III d'E. coli (rnc) et du gène codant pour la protéine de liaison au maltose (MBP). Cette exonucléase spécifique clive l'ARN double brin (ARNdb) et génère des fragments d'ARNdb de 18 à 25 pb avec un groupement 5'-PO4 et des surplombs de 3'-OH et 3'.
Composants
| Composants | 0,2KU | 1KU |
| RNase III (2U/μL) | 100 µL | 500 µL |
| 10 × Tampon | 1 mL | 1 mL |
| 10 × EDTA | 1 mL | 1 mL |
| MnCI2 | 1 mL | 1 mL |
| Glycogène sans RNase | 0,05 mL | 0,05 mL |
Stockage
Conserver à -25～-15℃, transport par glace sèche.
Définition de l'unité
Une unité correspond à la quantité d'enzyme nécessaire pour dégrader 1 μg d'ARNdb en ARNsi dans un système réactionnel de 50 μL à 37 °C pendant 20 minutes. (Température de réaction optimale : 37 °C)
Contrôle de qualité
Pureté ≥ 95 %, absence d'activité DNase, RNase et exonucléase
Système de réaction et condition
| Composants | Volume |
| Eau sans nucléase | Jusqu'à 100 µL |
| 10 × Tampon | 10 µL |
| ARNdb | 10 µg |
| RNase III | 10 µL |
| 10 × MnCl2 | 10 µL |
Temps de réaction : Incuber à 37 °C pendant 1 h.
Inactivation de la réaction :Ajouter 10 µl d'EDTA 10× pour stopper la réaction. Ne pas inactiver par la chaleur. Chauffer
L'inactivation réduit le rendement en siRNA.
Notes
- Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter une blouse de laboratoire et des gants jetables.
- Le volume du système de réaction peut être augmenté ou diminué en fonction des besoins réels.