RNase R HYJ412
La RNase R (ribonucléase R) est une ribonucléase 3'-5' appartenant à la superfamille des RNR d'Escherichia coli. Elle clive l'ARN en dinucléotides et trinucléotides de manière séquentielle, de l'extrémité 3' vers l'extrémité 5'. La RNase R digère la quasi-totalité des molécules d'ARN linéaires, mais est moins sensible aux ARN circulaires, aux structures en lasso ou aux ARN double brin présentant un débordement 3' inférieur à 7 nucléotides. La RNase R est couramment utilisée dans les études d'expression génique et d'épissage alternatif. Elle digère l'ARN linéaire pour enrichir les ARN circulaires et les ARN en lasso. La RNase R clive l'ARN linéaire pour enrichir les ARN circulaires, qui sont utilisés pour construire des banques d'ADNc introniques à partir d'ARN total.
Composants
| Composants | 0,5 KU | 5 À |
| RNase R (20 U/μL) | 25 µL | 250 μL |
| Tampon de réaction 10× | 1 mL | 10×1 mL |
Informations sur le produit
| Propriétés du produit | Liquide transparent |
| Source | E. coli |
| Définition de l'activité | Une unité d'activité (U) est définie comme la quantité d'enzyme nécessaire pour convertir 1 μg de poly-r(A) en nucléotides solubles dans l'acide dans une réaction standard à 37°C en 10 minutes. |
| Température de réaction optimale | 37℃ |
| Tampon de stockage | Tris-HCl 50 mM (pH 7,5 à 25 °C), NaCl 100 mM, DTT 1 mM, EDTA 0,1 mM, glycérol 50 %, Triton® X-100 0,1 % |
| Tampon de réaction 10× | Tris-HCl 200 mM (pH 8,20 à 25 °C), MgCl₂ 1 mM21 M KCl |
| Conditions de stockage | -25 ~ -18℃, éviter les cycles répétés de congélation et de décongélation. |
Contrôle de qualité
1. Pureté (SDS-PAGE) : ≥95 %.
2. Résiduel ET.coli ADN : Test RT-qPCR utilisant 10 μL de RNase R pour l'ADNr 16S avec une valeur Ct ≥35.
3. Activité endonucléase : Aucune dégradation n'a été détectée lorsque 1 μg d'ARNdb a été incubé à 37 °C pendant 4 heures dans une réaction de 20 μL contenant au moins 10 U de RNase R.
4. Activité DNase : Aucune dégradation n'a été détectée lorsque 1 μg d'ADN pUC19 a été incubé à 37 °C pendant 4 heures dans une réaction de 10 μL contenant au moins 10 U de RNase R.
5. Test fonctionnel : L’activité de la RNase R a été évaluée dans une réaction contenant 10 U de RNase R et 3 µg d’ARN total extrait de cellules 293T. L’abondance de l’ARN a été déterminée par RT-qPCR. Les valeurs ΔCt des ARN linéaires étaient ≥ 4,5 et celles des ARN circulaires ≤ 1, calculées avec et sans digestion par la RNase R.