Mélange maître colorimétrique LAMP (lyophilisation in situ) HYB311
Ce produit contient un tampon de réaction, un mélange d'enzymes RT (ADN polymérase Bst et transcriptase inverse thermorésistante), des agents protecteurs lyophilisés et des colorants chromogènes. Il se présente sous forme de comprimés lyophilisés à fond de tube ; seuls l'amorce et la matrice doivent être ajoutées lors de son utilisation.
Ce kit permet une détection visuelle rapide et claire de l'amplification ; une réaction négative est indiquée en rouge et une réaction positive par un changement de couleur au jaune.
Composants
| Composant | 96T | 960T | 9600T |
| Colorimétrie à lampe RT (lyophilisation in situ) | 8T/bande*12bandes | 8T/bande*120bande | 8T/bande*1200bande |
Applications
Pour l'amplification isotherme de l'ADN ou de l'ARN.
Conditions de stockage
Transporté et stocké entre 2 et 8 °C. Ce produit a une durée de conservation de 12 mois.
Protocole
Prélever la quantité correspondante de poudre lyophilisée au fond du tube, en fonction du nombre d'essais. Préparer le mélange réactionnel.
| Composant | Volume |
| Mélange maître colorimétrique RT-LAMP (lyophilisation in situ) | 1 pièce |
| Mélange d'apprêt 10×un | 5 ml |
| ADN/ARN matriceb | 45 ml |
Notes
1. Concentration du mélange d'amorces 10× : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B ;
2. Il est recommandé de dissoudre les matrices d'acides nucléiques dans de l'eau DEPC.
3. Incuber à 65 °C pendant 30 à 45 minutes, durée qui peut être prolongée en fonction du temps de réaction du changement de couleur.
4. Identification directe par la couleur : le jaune était positif et le rouge négatif.
Notes
La température de réaction peut être optimisée entre 62℃ et 68℃ en fonction des conditions d'amorçage.
Les réactifs conditionnés ne doivent pas être exposés à l'air pendant une période prolongée.
La réaction de décoloration rouge et jaune dépend de la variation de pH du système réactionnel ; veuillez ne pas utiliser de solution de stockage d'acide nucléique contenant du Tris, il est recommandé d'utiliser de l'eau distillée (ddH2O) pour le stockage de l'acide nucléique.
L'expérience doit être menée de manière standardisée, y compris la préparation du système réactionnel, le traitement de l'échantillon et l'ajout de l'échantillon.
La température de réaction peut être optimisée entre 62℃ et 68℃ en fonction des conditions d'amorçage.
Il est conseillé de préparer le système réactionnel sur une table ultra-propre et d'ajouter les gabarits sous la hotte des autres pièces afin d'éviter les erreurs.