Mélange maître colorimétrique RT-LAMP (billes lyophilisées) HIB412
Ce produit contient un tampon de réaction, un mélange d'enzymes RT (ADN polymérase Bst et transcriptase inverse thermorésistante), des protecteurs lyophilisés et des colorants chromogènes. Il se présente sous forme de billes lyophilisées et s'utilise uniquement avec des amorces et des matrices. Ce kit permet une détection visuelle rapide et claire de l'amplification : une réaction négative est indiquée en rouge et une réaction positive en jaune.
Composants
| Composants | 96 T | 960 T | 9600 T |
| Mélange maître colorimétrique RT-LAMP (billes lyophilisées) | 8 bandes T×12 | 8 T/bande×120 | 8 T/bande×1200 |
Stockage
À conserver entre 2 et 8 °C, valable 12 mois.
Instructions
1. Prélevez le nombre correspondant de poudre de billes lyophilisées en fonction du nombre de tests.
2. Préparer le mélange réactionnel
| Composants | Volume |
| Mélange maître colorimétrique RT-LAMP (billes lyophilisées) | 1 pièce (2 perles) |
| Mélange d'apprêt 10×* | 5 ml |
| ADN/ARN matrice** | 45 ml |
*Concentration du mélange d'amorces 10× : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B ;
**Il est recommandé de dissoudre les matrices d'acides nucléiques dans de l'eau DEPC.
3. Incuber à 65 °C pendant 30 à 45 minutes, durée qui peut être prolongée en fonction du temps de réaction du changement de couleur.
4. À l'œil nu, le jaune était positif et le rouge négatif.
Notes
1. La température de réaction peut être optimisée entre 62 °C et 68 °C en fonction des conditions initiales.
2. Les réactifs conditionnés ne doivent pas être exposés à l'air pendant une période prolongée.
3. La réaction de décoloration rouge et jaune dépend des variations de pH du milieu réactionnel. Veuillez ne pas utiliser de solution de conservation d'acide nucléique contenant du Tris ; il est recommandé d'utiliser du ddH.2O acide nucléique stocké ;
4. L'expérience doit être menée de manière normalisée, y compris la préparation du système réactionnel, le traitement de l'échantillon et l'échantillonnage.
5. Il est suggéré de préparer le système de réaction sur la table ultra-propre et d'ajouter des gabarits dans la hotte des autres pièces pour éviter les erreurs.