Mélange maître pour sonde RT-LAMP (billes lyophilisées) HIB416
Ce produit contient un tampon de réaction, une ADN polymérase Bst, un mélange d'enzymes de transcriptase inverse thermorésistantes (RT-Enzymes Mix) et des composants protecteurs lyophilisés. Le tampon de réaction contient du magnésium (Mg).2+Le produit contient des dNTP et d'autres composants nécessaires à l'amplification. Il se présente sous forme de pastilles lyophilisées ; seuls les amorces et les matrices doivent être ajoutées lors de son utilisation.
Composants
| Composants | 96 T | 960 T | 9600 T |
| Mélange maître pour sonde RT-LAMP (billes lyophilisées) | 8 bandes T×12 | 8 T/bande×120 | 8 T/bande×1200 |
Stockage
À conserver entre 2 et 8 °C, valable 12 mois.
Instructions
1. Prélevez le nombre correspondant de billes lyophilisées en fonction du nombre de tests.
2. Préparer le système réactionnel
| Composant | Volume |
| Mélange maître pour sonde RT-LAMP (billes lyophilisées) | Une pièce |
| Mélange de sondes d'amorces 10×* | 5 μL |
| ARN matrice** | 45 μL |
*10× Concentration du mélange d'amorces : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B, 4 μM sonde ;
**Il est recommandé de dissoudre la matrice d'acide nucléique dans de l'eau DEPC.
3. Réaction d'amplification
Configurez le programme suivant sur un instrument de PCR fluorescent (tel que ABI7500, etc.).
| Température | Temps | Cycles |
| 65℃ | années 60 *Collecter la fluorescence FAM | 30 |
Notes
1. La température de réaction peut être optimisée entre 62℃ et 68℃ en fonction de la situation de l'amorce ;
2. L'expérience doit être menée de manière standardisée, y compris la préparation du système réactionnel, la lyophilisation, le traitement de l'échantillon et l'ajout de l'échantillon ;
3. Afin d'éviter toute contamination, il est recommandé de préparer le système de réaction dans une salle blanche et d'ajouter le gabarit sous une hotte aspirante dans d'autres pièces afin d'éviter les interférences faussement positives.