UNG HYA314 thermosensible
L'UNG thermosensible est une enzyme UNG thermosensible obtenue par expression recombinante chez *E. coli*. Cette enzyme catalyse la libération d'uracile libre à partir d'ADN simple brin et double brin contenant de l'uracile, et est inactive sur l'ARN. Comparée aux enzymes UNG conventionnelles issues de gènes d'*E. coli*, l'UNG thermosensible présente une activité accrue à basse température (20 °C à 37 °C), est sensible à la température et s'inactive facilement (à 50 °C), évitant ainsi la dégradation des produits d'amplification contenant du dUTP à température ambiante par l'activité résiduelle qui pourrait subsister après l'inactivation de l'enzyme UNG conventionnelle. Par conséquent, l'UNG thermosensible est non seulement plus adaptée aux réactions de PCR anti-contamination, mais également compatible avec les procédures d'amplification RT-PCR et applicable aux réactions de RT-PCR anti-contamination.
Composants
| Composant | 100 U | 1000 U | 5000 U |
| 1 U/µL UNG thermosensible | 100 µL | 1 mL | 5 mL |
Stockage
Conserver entre -25°C et -15°C.
Définition de l'unité
1 unité est définie comme la quantité d'enzyme qui dégrade 1 µg d'ADN simple brin contenant du dU en 1 heure à 37°C.
Contrôle de qualité
1. Pureté de l'électrophorèse SDS-PAGE supérieure à 98 %.
2. Activité de dégradation, variation d'un lot à l'autre et stabilité.
3. Aucune activité nucléasique exogène.
Notes
1. La température de réaction optimale de l'UNG thermosensible est relativement basse. Le dosage de l'enzyme et le temps de réaction peuvent être optimisés dans la plage suivante : 20 °C à 37 °C, 0,1 à 0,5 U, 5 à 10 min ; l'enzyme peut être inactivée pendant le processus de transcription inverse.
2. Convient pour une utilisation anti-contamination en PCR et RT-PCR.
3. Évitez les cycles répétés de congélation et de décongélation, et ne les exposez pas à un environnement présentant d'importantes fluctuations de température.
4. L'efficacité d'utilisation du dUTP et la sensibilité à l'enzyme UNG varient selon les gènes à amplifier. Par conséquent, si l'utilisation du système UNG entraîne une diminution de la sensibilité de détection, le système réactionnel doit être ajusté et optimisé. Pour toute assistance technique, veuillez contacter notre société.