Pasgan DNA/RNA Bhìorasach Uile-choitcheann Magnetic HYD521
Tha an Pasgan DNA/RNA Bhìorasach Uile-choitcheann Magnetic freagarrach airson searbhag niuclasach bhìorasach a thoirt a-mach à fuil slàn no lionntan bodhaig gun cheallan (leithid serum, plasma, lionn cerebrospinal, swaban nasal/pharyngeal, lionn lavage alveolar, msaa.). Bidh an dòigh seo a’ cleachdadh teicneòlas glanaidh grìogagan magnetach, agus chan eil feum air toirt a-mach phenol cloroform puinnseanta rè a’ phròiseas toirt a-mach. Tha e sàbhailte, neo-phuinnseanta agus luath. Faodar an toradh a gheibhear a chleachdadh gu dìreach ann am PCR, qPCR, sreathan dàrna ginealach agus deuchainnean eile. Nuair a thèid a chleachdadh le ionnstramaidean toirt a-mach fèin-ghluasadach grìogagan magnetach, faodar toirt a-mach searbhagan niuclasach àrd-toraidh a choileanadh.
Fiosrachadh mun toradh
| Co-phàirtean | 48T |
| Lysis agus Fuasgladh Ceangail | 33 ml |
| Crochadh grìogagan magnetach | 1.1 ml |
| Bufair nighe A | 40 ml |
| Bufair nighe B | 80 ml |
| Fuasgladh elution | 10 ml |
| Pròtaineas K | 1.1 ml |
Cumhaichean Stòraidh
Bu chòir Proteinase K a stòradh aig 2~8℃ agus bu chòir na grìtheidean eile a stòradh aig teòthachd an t-seòmair. Tha an ùine-sgeilp 18 mìosan.
Tuairisgeul Eisimpleir
1. Seòrsachan sampallan iomchaidh: fuil slàn, serum, plasma, lionn cerebrospinal, swaban nasal / pharyngeal, lionn lavage alveolar agus sampallan eile.
2. Stòradh is còmhdhail shampaill: Faodar sampallan a chleachdadh airson deuchainnean sa bhad no an stòradh aig -70℃ no nas ìsle airson deuchainnean. Is e 6 mìosan an ùine stòraidh. Bu chòir reothadh is leaghadh a-rithist is a-rithist a sheachnadh. Tha sampallan air an giùlan le slabhraidh fhuar.
3. Riatanasan reothadh-leaghadh: Reothadh is leaghadh luath, seachain reothadh is leaghadh a-rithist is a-rithist.
Obrachadh
Mus dèan thu an deuchainn, thoir sùil a bheil sileadh anns an fhuasgladh agus an gabh na grìogagan magnetach ath-fhulang.
1. Gluais 200~300 μL de shampall gu tiùb centrifuge 1.5 mL, cuir 600 μL de Lysis and Binding Solution, 20 μL de Proteinase K, agus 20 μL de chrochadh grìogagan magnetach ris ann an sreath, agus cuir vortex air aig astar àrd airson 30 diogan. Goir aig 50℃ airson 5~7 mionaidean. Mura h-eil gnìomh crith aig an teirmeastat, cuir vortex air 3 tursan rè na h-ùine goir, gach uair airson 15 diogan.
2. Gluais gu seasamh magnetach 1.5 mL airson dealachadh magnetach gus am bi am fuasgladh soilleir agus follaiseach, agus tilg air falbh am fuasgladh.
3. Cuir 700 μL de bhufair nighe A ris, measgaich le vortex airson 10 diogan gus na grìogagan magnetach a bhriseadh suas, agus an uairsin gluais gu seasamh magnetach airson dealachadh magnetach gus am bi am fuasgladh soilleir, agus tilg air falbh am fuasgladh.
4. Cuir 700 μL de bhufair nighe B ris, measgaich le vortex airson 10 diogan gus na grìogagan magnetach a bhriseadh suas, gluais gu seasamh magnetach airson dealachadh magnetach gus am bi am fuasgladh soilleir, agus tilg air falbh am fuasgladh.
5. Cuir 700 μL de bhufair nighe B ris a-rithist, measgaich le vortex airson 10 diogan gus na grìogagan magnetach a bhriseadh suas, gluais gu seasamh magnetach airson dealachadh magnetach gus am bi am fuasgladh soilleir, agus tilg air falbh am fuasgladh.
6. Cuir an tiùb ann an meadhan-chonnspaid goirid gus na boinneagan a chruinneachadh air balla an tiùba, gluais e gu seasamh magnetach airson soilleireachadh, agus gabh a-steach an leaghan a tha air fhàgail. Tiormaich san adhar airson 3-5 mionaidean.
Nota: Cuiridh fuigheall ethanol bacadh air ath-bheachdan einnsein às dèidh sin, mar sin dèan cinnteach gu bheil an ethanol a’ falmhachadh gu tur nuair a bhios e a’ tiormachadh. Na tiormaich airson ro fhada gus nach bi buaidh aig a’ bhuaidh elution às dèidh sin.
7. Cuir 40~100 μL de fhuasgladh Elution ris, cuir ann am vortex aig astar àrd airson 2~3 mionaidean gus na grìogagan magnetach a bhriseadh suas. Goir aig 60℃ airson 5 mionaidean, an uairsin cuir ann am vortex aig astar àrd airson 60 diogan.
8. Cuir an leaghan sa bhad ann an centrifuge gus an leaghan a chruinneachadh bhon chaip tiùba agus gluais e chun raca magnetach gus am bi na grìogagan magnetach air an glacadh gu tur. An uairsin gluais an leaghan gu faiceallach gu tiùb centrifuge ùr gus am fuasgladh searbhag niùclasach fhaighinn.
9. Faodar am fuasgladh searbhag niùclasach a stòradh aig -20°C airson stòradh geàrr-ùine agus -80°C airson stòradh fad-ùine.
Notaichean
1. Tha salainn guanidine anns na diofar bhufairean san inneal seo. Airson ur sàbhailteachd agus ur slàinte, cuiribh còta obair-lann agus miotagan cuidhteasach oirbh. Agus làimhsichibh a rèir ceumannan sàbhailteachd àbhaisteach. Na leigibh leis a’ bhufair conaltradh ris a’ chraiceann, na sùilean agus na membranan mucous. Ma thachras e, nighibh sa bhad le pailteas uisge agus faighibh aire mheidigeach.
2. Ma bhios an leaghan a’ sileadh, feumar a nighe ann an uisge aig 30℃ gus am bi an sileadh air a sgaoileadh gu tur mus tèid a chleachdadh.
3. Mura h-eil an crochadh grìogagan magnetach reòta, na cleachd e.
4. Tha salainn guanidine anns na diofar bhufairean sa phasgan seo. Na cleachd dì-ghalaran ocsaideachaidh leithid sodium hypochlorite gus an làimhseachadh, air neo thèid gasaichean puinnseanta a leigeil ma sgaoil agus feumar an làimhseachadh mar sgudal meidigeach.
5. Dh’fhaodadh grìogagan magnetach a bhith air fhàgail rè an elution. Feuch ri bhith a’ seachnadh anail a tharraing a-steach do ghrìogagan magnetach nuair a bhios tu a’ tarraing shamhlaichean.