Kit de ADN/ARN viral universal magnético HYD521
O kit magnético universal de ADN/ARN viral é axeitado para extraer ácido nucleico viral de sangue enteiro ou fluídos corporais libres de células (como soro, plasma, líquido cefalorraquídeo, frotis nasais/farínxeos, líquido de lavado alveolar, etc.). Este método emprega tecnoloxía de purificación con esferas magnéticas e non se require extracción con cloroformo de fenol tóxico durante o proceso de extracción. É seguro, non tóxico e rápido. O produto obtido pódese usar directamente en PCR, qPCR, secuenciación de segunda xeración e outros experimentos. Cando se usa con instrumentos de extracción automatizada con esferas magnéticas, pódese conseguir unha extracción de alto rendemento de ácidos nucleicos.
Información do produto
| Compoñentes | 48T |
| Solución de lise e unión | 33 ml |
| Suspensión de esferas magnéticas | 1,1 ml |
| Tampón de lavado A | 40 ml |
| Tampón de lavado B | 80 ml |
| Solución de elución | 10 ml |
| Proteinase K | 1,1 ml |
Condicións de almacenamento
A proteinase K debe almacenarse a 2~8 ℃ e os demais ingredientes deben almacenarse a temperatura ambiente. A vida útil é de 18 meses.
Descrición da mostra
1. Tipos de mostras aplicables: sangue enteiro, soro, plasma, líquido cefalorraquídeo, frotis nasais/farínxeos, líquido de lavado alveolar e outras mostras.
2. Almacenamento e transporte de mostras: As mostras poden usarse para a análise inmediatamente ou almacenarse a -70 ℃ ou menos para a análise. O período de almacenamento é de 6 meses. Débese evitar a conxelación e desconxelación repetidas. As mostras transportanse mediante cadea de frío.
3. Requisitos de conxelación e desconxelación: conxelación e desconxelación rápidas, evitar conxelacións e desconxelacións repetidas.
Operación
Antes do experimento, comprobe se a solución ten precipitación e se as esferas magnéticas poden resuspenderse.
1. Transferir 200~300 μL de mostra a un tubo de centrífuga de 1,5 mL, engadir 600 μL de solución de lise e unión, 20 μL de proteinase K e 20 μL de suspensión de esferas magnéticas secuencialmente e axitar en vórtice a alta velocidade durante 30 segundos. Incubar a 50 ℃ durante 5~7 minutos. Se o termostato non ten función de oscilación, axitar en vórtice 3 veces durante o período de incubación, cada vez durante 15 segundos.
2. Transferir a un soporte magnético de 1,5 mL para a separación magnética ata que a solución sexa clara e transparente e desbotar a solución.
3. Engadir 700 μL de tampón de lavado A, axitar en vórtice durante 10 segundos para romper as esferas magnéticas e, a seguir, transferir a un soporte magnético para a separación magnética ata que a solución sexa transparente e desbotar.
4. Engadir 700 μL de tampón de lavado B, axitar en vórtice durante 10 s para romper as esferas magnéticas, transferir a un soporte magnético para a separación magnética ata que a solución sexa transparente e desbotar a solución.
5. Engadir de novo 700 μL de tampón de lavado B, axitar en vórtice durante 10 s para romper as esferas magnéticas, transferir a un soporte magnético para a separación magnética ata que a solución sexa transparente e desbotar a solución.
6. Centrifugar brevemente para recoller as pingas na parede do tubo, transferilas a un soporte magnético para a súa clarificación e absorber o líquido residual. Deixar secar ao aire durante 3-5 minutos.
Nota: Os residuos de etanol inhibirán as reaccións encimáticas posteriores, polo que se debe asegurar que o etanol se evapore completamente ao secar. Non seque durante demasiado tempo para evitar afectar o efecto de elución posterior.
7. Engadir de 40 a 100 μL de solución de elución, axitar en vórtice a alta velocidade durante 2 a 3 minutos para romper as esferas magnéticas. Incubar a 60 ℃ durante 5 minutos e despois axitar en vórtice a alta velocidade durante 60 segundos.
8. Centrifugación instantánea para recoller o líquido da tapa do tubo e transferilo á gradilla magnética ata que as esferas magnéticas estean completamente adsorbidas. Despois, transfira coidadosamente o líquido a un novo tubo de centrífuga para obter a solución de ácido nucleico.
9. A solución de ácido nucleico pódese almacenar a -20 °C para almacenamento a curto prazo e a -80 °C para almacenamento a longo prazo.
Notas
1. Os distintos tampóns deste kit conteñen sales de guanidina. Pola súa seguridade e saúde, use unha bata de laboratorio e luvas desbotables. E manéxeo segundo as precaucións estándar de seguridade. Non permita que o tampón entre en contacto coa pel, os ollos e as membranas mucosas. Se isto ocorre, lávese inmediatamente con abundante auga e busque atención médica.
2. Se a solución precipita, cómpre bañala en auga a 30 ℃ ata que o precipitado se disolva completamente antes do seu uso.
3. Se a suspensión de esferas magnéticas está conxelada, non a empregue.
4. Os distintos tampóns deste kit conteñen sales de guanidina. Non empregue desinfectantes oxidantes como o hipoclorito de sodio para tratalos, xa que se non, liberaranse gases tóxicos e deberán tratarse como residuos médicos.
5. Pode haber esferas magnéticas residuais durante a elución. Tente evitar inhalar as esferas magnéticas ao aspirar mostras.