Pahu DNA/RNA Viral Universal Magnetic HYD521
He kūpono ka Magnetic Universal Viral DNA/RNA Kit no ka unuhi ʻana i ka waikawa nucleic viral mai ke koko holoʻokoʻa a i ʻole nā wai kino ʻole cell (e like me ke serum, plasma, wai cerebrospinal, nā swabs nasal/pharyngeal, wai lavage alveolar, a pēlā aku). Hoʻohana kēia ʻano hana i ka ʻenehana hoʻomaʻemaʻe bead magnetic, a ʻaʻohe pono o ka unuhi ʻawaʻawa phenol chloroform i ka wā o ke kaʻina hana unuhi. He palekana, ʻaʻohe ʻawaʻawa a wikiwiki hoʻi. Hiki ke hoʻohana pololei ʻia ka huahana i loaʻa i ka PCR, qPCR, ka hoʻonohonoho ʻana o ka hanauna ʻelua a me nā hoʻokolohua ʻē aʻe. Ke hoʻohana ʻia me nā mea hana unuhi automated bead magnetic, hiki ke hoʻokō ʻia ka unuhi ʻana o nā waikawa nucleic kiʻekiʻe.
ʻIke huahana
| Nā ʻāpana | 48T |
| Lysis a me ka Hoʻonā Hoʻopaʻa | 33 mL |
| Hoʻokuʻu ʻia ʻana o ka momi makeneka | 1.1 mL |
| ʻŌmole holoi A | 40 mL |
| ʻO ka mea holoi B | 80 mL |
| Hoʻonā Elution | 10 mL |
| ʻO ka proteinase K | 1.1 mL |
Nā Kūlana Mālama
Pono e mālama ʻia ka Proteinase K ma 2~8℃ a pono e mālama ʻia nā mea ʻē aʻe ma ka mahana o ka lumi. ʻO ke ola o ka papa he 18 mahina.
Wehewehe Laʻana
1. Nā ʻano laʻana kūpono: koko holoʻokoʻa, serum, plasma, wai cerebrospinal, nā swabs nasal/pharyngeal, wai lavage alveolar a me nā laʻana ʻē aʻe.
2. Ka mālama ʻana a me ka lawe ʻana i nā laʻana: Hiki ke hoʻohana koke ʻia nā laʻana no ka hoʻāʻo ʻana a i ʻole e mālama ʻia ma -70℃ a i ʻole ka haʻahaʻa no ka hoʻāʻo ʻana. ʻO ka manawa mālama he 6 mahina. Pono e pale ʻia ka hoʻopaʻahau pinepine ʻana a me ka hoʻoheheʻe ʻana. Lawe ʻia nā laʻana e ke kaulahao anu.
3. Nā koi no ka hau-hoʻoheheʻe: Hoʻopaʻa wikiwiki a hoʻoheheʻe, pale i ka hoʻopaʻa hou ʻana a me ka hoʻoheheʻe ʻana.
Hana
Ma mua o ka hoʻokolohua, e nānā inā he ua ka hopena a inā hiki ke hoʻokuʻu hou ʻia nā momi magnetic.
1. E hoʻoili i 200 ~ 300 μL o ka hāpana i kahi paipu centrifuge 1.5 mL, e hoʻohui i 600 μL o Lysis a me ka Binding Solution, 20 μL o Proteinase K, a me 20 μL o ka magnetic bead suspension ma ke kaʻina, a vortex ma ka wikiwiki kiʻekiʻe no 30 kekona. E hoʻomoʻa ma 50 ℃ no 5 ~ 7 mau minuke. Inā ʻaʻohe hana oscillation o ka thermostat, e vortex i 3 mau manawa i ka wā hoʻomoʻa, i kēlā me kēia manawa no 15 kekona.
2. E hoʻololi i kahi kū magnetic 1.5 mL no ka hoʻokaʻawale magnetic a hiki i ka moakāka a moakāka ka hopena, a laila e hoʻolei i ka hopena.
3. E hoʻohui i 700 μL o ka buffer holoi A, vortex no 10 kekona e wāwahi i nā momi magnetic, a laila e hoʻoili i kahi kū magnetic no ka hoʻokaʻawale magnetic a hiki i ka moakāka o ka hopena, a hoʻolei i ka hopena.
4. E hoʻohui i 700 μL o ka buffer holoi B, vortex no 10 kekona e wāwahi i nā momi magnetic, e hoʻoili i kahi kū magnetic no ka hoʻokaʻawale magnetic a hiki i ka moakāka o ka hopena, a e hoʻolei i ka hopena.
5. E hoʻohui hou i 700 μL o ka buffer holoi B, vortex no 10 kekona e wāwahi i nā momi magnetic, e hoʻoili i kahi kū magnetic no ka hoʻokaʻawale magnetic a hiki i ka moakāka o ka hopena, a e hoʻolei i ka hopena.
6. E centrifuge no ka manawa pōkole e hōʻiliʻili i nā kulu liʻiliʻi ma ka paia o ka paipu, e hoʻololi i kahi kū magnetic no ka hoʻomālamalama ʻana, a omo i ke koena wai. E hoʻomaloʻo i ka ea no 3-5 min.
Nānā: E kāohi ke koena ethanol i nā hopena enzyme ma hope, no laila e hōʻoia i ka mahu loa ʻana o ka ethanol i ka wā e maloʻo ai. Mai hoʻomaloʻo no ka manawa lōʻihi e pale aku ai i ka hopena o ka elution ma hope.
7. E hoʻohui i 40 ~ 100 μL o ka hopena Elution, vortex ma ka wikiwiki kiʻekiʻe no 2 ~ 3 min e wāwahi i nā momi magnetic. E hoʻomoʻa ma 60 ℃ no 5 min, a laila vortex ma ka wikiwiki kiʻekiʻe no 60 s.
8. E hoʻohana i ka centrifuge koke e hōʻiliʻili i ka wai mai ke poʻi o ka paipu a hoʻoili iā ia i ka ʻūpā magnetic a hiki i ka wā e hoʻopili piha ʻia ai nā momi magnetic. A laila e hoʻoili pono i ka wai i kahi paipu centrifuge hou e loaʻa ai ka hopena waikawa nucleic.
9. Hiki ke mālama ʻia ka hopena waikawa nucleic ma -20°C no ka mālama ʻana i ka wā pōkole a me -80°C no ka mālama ʻana i ka wā lōʻihi.
Nā memo
1. Aia nā paʻakai guanidine i loko o nā mea pale like ʻole i loko o kēia pahu. No kou palekana a me kou olakino, e ʻoluʻolu e ʻaʻahu i kahi kapa lab a me nā mīkina lima hoʻolei. A e lawelawe e like me nā hana palekana. Mai hoʻokuʻu i ka mea pale e pili i ka ʻili, nā maka a me nā membrane mucous. Inā hana ia, e ʻoluʻolu e holoi koke me ka wai nui a e ʻimi i ke kōkua lapaʻau.
2. Inā e hoʻopūʻiwa ʻia ka wai, pono e ʻauʻau ʻia i loko o ka wai 30℃ a hiki i ka wā e hoʻoheheʻe loa ʻia ai ka wai ma mua o ka hoʻohana ʻana.
3. Inā ua paʻahau ʻia ka mea hoʻoheheʻe ʻia o ka bead magnetic, mai hoʻohana.
4. Aia nā paʻakai guanidine i loko o kēia pahu hana. Mai hoʻohana i nā mea hoʻomaʻemaʻe oxidizing e like me ka sodium hypochlorite e mālama iā lākou, a i ʻole e hoʻokuʻu ʻia nā kinoea ʻawahia a pono e mālama ʻia e like me nā ʻōpala lapaʻau.
5. Aia paha he mau momi magnetic i koe i ka wā elution ai. E ho'āʻo e pale i ka hanu ʻana i nā momi magnetic i ka wā e omo ai i nā laʻana.