Magnetski univerzalni komplet za virusnu DNA/RNA HYD521
Univerzalni magnetski komplet za virusnu DNA/RNA prikladan je za ekstrakciju virusne nukleinske kiseline iz pune krvi ili tjelesnih tekućina bez stanica (kao što su serum, plazma, cerebrospinalna tekućina, brisevi nosa/ždrijela, tekućina alveolarne lavaže itd.). Ova metoda koristi tehnologiju pročišćavanja magnetskim kuglicama i tijekom procesa ekstrakcije nije potrebna ekstrakcija toksičnim fenol-kloroformom. Sigurna je, netoksična i brza. Dobiveni produkt može se izravno koristiti u PCR, qPCR, sekvenciranju druge generacije i drugim eksperimentima. Kada se koristi s automatiziranim instrumentima za ekstrakciju magnetskim kuglicama, može se postići visokopropusna ekstrakcija nukleinskih kiselina.
Informacije o proizvodu
| Komponente | 48T |
| Otopina za lizu i vezanje | 33 ml |
| Magnetska suspenzija kuglica | 1,1 mL |
| Pufer za pranje A | 40 ml |
| Pufer za pranje B | 80 ml |
| Otopina za eluciju | 10 ml |
| Proteinaza K | 1,1 mL |
Uvjeti skladištenja
Proteinazu K treba čuvati na 2~8 ℃, a ostale sastojke na sobnoj temperaturi. Rok trajanja je 18 mjeseci.
Primjer opisa
1. Primjenjive vrste uzoraka: puna krv, serum, plazma, cerebrospinalna tekućina, brisevi nosa/ždrijela, tekućina alveolarne lavaže i drugi uzorci.
2. Skladištenje i transport uzoraka: Uzorci se mogu odmah koristiti za testiranje ili pohraniti na -70℃ ili niže za testiranje. Razdoblje skladištenja je 6 mjeseci. Treba izbjegavati ponovljeno zamrzavanje i odmrzavanje. Uzorci se transportiraju hladnim lancem.
3. Zahtjevi za zamrzavanje i odmrzavanje: Brzo zamrzavanje i odmrzavanje, izbjegavajte ponovljeno zamrzavanje i odmrzavanje.
Operacija
Prije eksperimenta provjerite ima li otopina taloga i mogu li se magnetske kuglice resuspendirati.
1. Prebacite 200~300 μL uzorka u centrifugalnu epruvetu od 1,5 mL, dodajte 600 μL otopine za lizu i vezanje, 20 μL proteinaze K i 20 μL suspenzije magnetskih kuglica redom te vrtložite velikom brzinom 30 sekundi. Inkubirajte na 50℃ tijekom 5~7 minuta. Ako termostat nema funkciju oscilacije, vrtložite 3 puta tijekom inkubacije, svaki put po 15 sekundi.
2. Prebacite u magnetski stalak od 1,5 mL za magnetsku separaciju dok otopina ne postane bistra i prozirna, a zatim otopinu bacite.
3. Dodajte 700 μL pufera za ispiranje A, vrtložite 10 sekundi kako biste razbili magnetske kuglice, a zatim premjestite na magnetski stalak za magnetsku separaciju dok otopina ne postane bistra i bacite otopinu.
4. Dodajte 700 μL pufera za ispiranje B, vrtložite 10 sekundi kako biste razbili magnetske kuglice, premjestite na magnetski stalak za magnetsku separaciju dok otopina ne postane bistra i bacite otopinu.
5. Ponovno dodajte 700 μL pufera za ispiranje B, vrtložite 10 sekundi kako biste razbili magnetske kuglice, prebacite na magnetski stalak za magnetsku separaciju dok otopina ne postane bistra i bacite otopinu.
6. Kratko centrifugirajte kako biste sakupili kapljice na stijenci epruvete, premjestite na magnetski stalak za bistrenje i upijte preostalu tekućinu. Sušite na zraku 3-5 minuta.
Napomena: Ostaci etanola inhibirat će naknadne enzimske reakcije, stoga se pobrinite da etanol potpuno ispari tijekom sušenja. Nemojte sušiti predugo kako biste izbjegli utjecaj na naknadni učinak eluiranja.
7. Dodajte 40~100 μL otopine za eluciju, vrtložite velikom brzinom 2~3 minute kako biste razbili magnetske kuglice. Inkubirajte na 60℃ tijekom 5 minuta, a zatim vrtložite velikom brzinom tijekom 60 sekundi.
8. Instant centrifugirajte kako biste prikupili tekućinu s čepa epruvete i prenijeli je na magnetski stalak dok se magnetske kuglice potpuno ne adsorbiraju. Zatim pažljivo prenesite tekućinu u novu centrifugalnu epruvetu kako biste dobili otopinu nukleinske kiseline.
9. Otopina nukleinske kiseline može se čuvati na -20 °C za kratkotrajno skladištenje i na -80 °C za dugotrajno skladištenje.
Bilješke
1. Različiti puferi u ovom kompletu sadrže gvanidinske soli. Radi vaše sigurnosti i zdravlja, nosite laboratorijski ogrtač i jednokratne rukavice. Rukujte u skladu sa sigurnosnim mjerama opreza. Ne dopustite da pufer dođe u kontakt s kožom, očima i sluznicama. Ako se to dogodi, odmah isperite s puno vode i potražite liječničku pomoć.
2. Ako se otopina taloži, prije upotrebe je potrebno je potopiti u vodu temperature 30 ℃ dok se talog potpuno ne otopi.
3. Ako je suspenzija magnetskih kuglica smrznuta, nemojte je koristiti.
4. Različiti puferi u ovom kompletu sadrže gvanidinske soli. Nemojte koristiti oksidirajuća dezinfekcijska sredstva poput natrijevog hipoklorita za njihovu obradu, jer će se u suprotnom osloboditi otrovni plinovi te se moraju zbrinuti kao medicinski otpad.
5. Tijekom eluiranja mogu postojati zaostale magnetske kuglice. Pokušajte izbjegavati udisanje magnetskih kuglica prilikom aspiracije uzoraka.