Twous ADN/ARN viral inivèsèl mayetik HYD521
Twous ADN/ARN viral inivèsèl mayetik la apwopriye pou ekstrè asid nikleyik viral nan san konplè oswa likid kòporèl san selil (tankou serom, plasma, likid sefaloradyen, prelèvman nazal/fareng, likid lavaj alveolè, elatriye). Metòd sa a itilize teknoloji pirifikasyon pèl mayetik, epi pa gen okenn ekstraksyon klorofòm fenòl toksik ki nesesè pandan pwosesis ekstraksyon an. Li an sekirite, ki pa toksik epi rapid. Pwodwi yo jwenn nan ka itilize dirèkteman nan PCR, qPCR, sekansaj dezyèm jenerasyon ak lòt eksperyans. Lè yo itilize li avèk enstriman ekstraksyon otomatik pèl mayetik, yo ka reyalize ekstraksyon asid nikleyik ak gwo debi.
Enfòmasyon sou pwodwi a
| Konpozan | 48T |
| Solisyon Liz ak Obligasyon | 33 mL |
| Sispansyon pèl mayetik | 1.1 mL |
| Tanpon lave A | 40 mL |
| Tanpon lave B | 80 mL |
| Solisyon elisyon | 10 mL |
| Pwoteinaz K | 1.1 mL |
Kondisyon Depo
Pwoteinaz K a ta dwe konsève nan yon tanperati 2 ~ 8 ℃ epi lòt engredyan yo ta dwe konsève nan tanperati chanm. Dire li se 18 mwa.
Deskripsyon Egzanp
1. Kalite echantiyon ki aplikab yo: san konplè, serom, plasma, likid sefaloradyen, echantiyon pou nen/farinj, likid lavaj alveolè ak lòt echantiyon.
2. Depo ak transpò echantiyon yo: Ou ka itilize echantiyon yo pou fè tès imedyatman oubyen estoke yo nan -70℃ oubyen pi ba. Peryòd depo a se 6 mwa. Ou ta dwe evite konjelasyon ak deglasaj repete. Yo transpòte echantiyon yo atravè chèn frèt.
3. Kondisyon pou konjelasyon ak dekonjelasyon: Konjelasyon ak dekonjelasyon rapid, evite repete konjelasyon ak dekonjelasyon.
Operasyon
Anvan eksperyans lan, tcheke si solisyon an gen presipitasyon epi si pèl mayetik yo ka resispann.
1. Transfere 200~300 μL echantiyon an nan yon tib santrifij 1.5 mL, ajoute 600 μL Solisyon Liz ak Lyezon, 20 μL Pwoteinaz K, ak 20 μL sispansyon pèl mayetik youn apre lòt, epi brase an wotasyon rapid pandan 30 segonn. Enkube a 50℃ pandan 5~7 minit. Si tèmosta a pa gen yon fonksyon osilasyon, brase an wotasyon rapid 3 fwa pandan peryòd enkubasyon an, chak fwa pandan 15 segonn.
2. Transfere nan yon sipò mayetik 1.5 mL pou separasyon mayetik jiskaske solisyon an vin klè e transparan, epi jete solisyon an.
3. Ajoute 700 μL nan tanpon lave A, brase pandan 10 segonn pou kraze pèl mayetik yo, epi transfere nan yon sipò mayetik pou separasyon mayetik jiskaske solisyon an vin klè, epi jete solisyon an.
4. Ajoute 700 μL nan tanpon lave B, brase pandan 10 s pou kraze pèl mayetik yo, transfere nan yon sipò mayetik pou separasyon mayetik jiskaske solisyon an vin klè, epi jete solisyon an.
5. Ajoute 700 μL nan tanpon lave B ankò, brase pandan 10 s pou kraze pèl mayetik yo, transfere nan yon sipò mayetik pou separasyon mayetik jiskaske solisyon an vin klè, epi jete solisyon an.
6. Santrifije yon ti tan pou kolekte gout ki sou miray tib la, transfere l nan yon sipò mayetik pou klarifye l, epi absòbe likid ki rete a. Kite l seche nan lè a pandan 3-5 minit.
Nòt: Rezid etanòl la ap anpeche reyaksyon anzim ki vin apre yo, kidonk asire w ke etanòl la evapore nèt lè w ap seche. Pa seche pou twò lontan pou evite afekte efè elisyon ki vin apre a.
7. Ajoute 40~100 μL solisyon elisyon, brase ak gwo vitès pandan 2~3 minit pou kraze pèl mayetik yo. Enkube nan 60℃ pandan 5 minit, apresa brase ak gwo vitès pandan 60 segonn.
8. Santrifij enstantane pou kolekte likid ki nan bouchon tib la epi transfere li nan etajè mayetik la jiskaske pèl mayetik yo konplètman absòbe. Apre sa, transfere likid la avèk anpil atansyon nan yon nouvo tib santrifij pou jwenn solisyon asid nikleyik la.
9. Solisyon asid nikleyik la ka estoke nan -20 °C pou depo kout tèm ak -80 °C pou depo alontèm.
Nòt
1. Diferan tanpon ki nan twous sa a gen sèl guanidin. Pou sekirite ak sante w, tanpri mete yon rad laboratwa ak gan jetab. Epi manyen dapre prekosyon sekirite estanda yo. Pa kite tanpon an antre an kontak ak po a, je yo ak manbràn mikez yo. Si sa rive, tanpri lave imedyatman avèk anpil dlo epi chèche swen medikal.
2. Si solisyon an presipite, li bezwen benyen nan dlo 30 ℃ jiskaske presipite a fonn nèt anvan ou itilize li.
3. Si sispansyon pèl mayetik la jele, pa sèvi avè l.
4. Diferan tanpon ki nan twous sa a gen sèl guanidin. Pa sèvi ak dezenfektan oksidan tankou ipoklorit sodyòm pou trete yo, sinon gaz toksik ap lage epi yo dwe trete yo kòm dechè medikal.
5. Kapab gen grenn mayetik ki rete pandan elisyon an. Eseye evite respire grenn mayetik yo lè w ap aspire echantiyon yo.