2× PCR Premix (dengan Pewarna) HYA442
2× PCR Master Mix mengandung Taq DNA Polymerase, dNTP, dan komponen lain yang dibutuhkan untuk PCR. Master Mix ini stabil selama 3 bulan pada suhu 4℃ dengan stabilisator khusus kami. Larutan pra-campuran dioptimalkan untuk PCR konvensional dan siap digunakan dengan menambahkan templat DNA dan primer. Produk PCR dapat langsung dimuat untuk elektroforesis dengan pewarna bromofenol biru yang sudah dimuat sebelumnya. Produk yang diamplifikasi mengandung tonjolan 3'-dA dan dapat dengan mudah dikloning ke dalam vektor T. 2× PCR Master Mix menyederhanakan prosedur PCR dan mengurangi kontaminasi.
Komponen
| Komponen | Ukuran-1 | Ukuran-2 | Ukuran-3 |
| 2× Premix PCR (dengan Pewarna) | 5 ml | 1 mL×15 | 1 mL×50 |
Penyimpanan
Simpan pada suhu -20°C selama 2 tahun.
Instruksi
1. Sistem Reaksi
| Komponen | Volume |
| 2× Premix PCR (dengan Pewarna) | 25 uL |
| Primer Maju (10 μM) | 2 µL |
| Primer Balik (10 μM) | 2 µL |
| Templat DNA* | Variabel |
| ddH2ITU | Hingga 50 µL |
*Penggunaan templat: DNA genom 50-200 ng; 0,1-10 ng DNA plasmid
2. Program Reaksi
| Melangkah | Suhu | Waktu | Siklus |
| Denaturasi Awal | 94 ℃ | 5 menit | 1 |
| Denaturasi | 94 ℃ | 30 detik | 35 |
| Pemanasan | 50-60 ℃ | 30 detik | |
| Perpanjangan | 72 ℃ | 30-60 detik/kb | |
| Perpanjangan Akhir | 72 ℃ | 10 menit | 1 |
| Memegang | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ Konsentrasi: Produk ini mengandung 3 mM MgCl2, cocok untuk sebagian besar reaksi PCR.
2. Suhu annealing: Silakan merujuk pada nilai Tm teoritis primer. Suhu annealing dapat diatur 2-5℃ lebih rendah dari nilai teoritis primer.
3. Waktu ekstensi: Untuk identifikasi molekuler, disarankan 30 detik/kb. Untuk kloning gen, disarankan 60 detik/kb.
Catatan
1. Produk PCR dengan 2× PCR Master Mix tidak cocok untuk elektroforesis gel poliakrilamida.
2. Demi keselamatan dan kesehatan Anda, harap kenakan jas lab dan sarung tangan sekali pakai selama pengoperasian.
3. Ini hanya digunakan untuk keperluan penelitian SAJA!