Segulmagnað alhliða veiru DNA/RNA sett HYD521
Segulmagnað alhliða veiru DNA/RNA sett hentar til að vinna út veirukjarnsýrur úr heilu blóði eða frumulausum líkamsvökvum (eins og sermi, plasma, heila- og mænuvökva, nef-/koksýnum, lungnablöðruskolvatni o.s.frv.). Þessi aðferð notar segulperluhreinsunartækni og ekki er þörf á eitruðum fenólklóróformútdrætti við útdráttarferlið. Það er öruggt, eiturefnalaust og hraðvirkt. Hægt er að nota afurðina beint í PCR, qPCR, annarrar kynslóðar raðgreiningu og aðrar tilraunir. Þegar það er notað með sjálfvirkum útdráttartækjum fyrir segulperlur er hægt að ná fram mikilli afköstum í útdrætti kjarnsýra.
Upplýsingar um vöru
| Íhlutir | 48 tonn |
| Lýsing og bindingarlausn | 33 ml |
| Segulperlufjöðrun | 1,1 ml |
| Þvottabuff A | 40 ml |
| Þvottabuff B | 80 ml |
| Útskiljunarlausn | 10 ml |
| Próteinasi K | 1,1 ml |
Geymsluskilyrði
Geymið próteinasa K við 2~8°C og önnur innihaldsefni við stofuhita. Geymsluþolið er 18 mánuðir.
Dæmi um lýsingu
1. Viðeigandi sýnategundir: heilblóð, sermi, plasma, heila- og mænuvökvi, nef-/koksýni, lungnablöðruskolun og önnur sýni.
2. Geymsla og flutningur sýna: Hægt er að nota sýnin strax til prófunar eða geyma þau við -70°C eða lægra hitastig. Geymslutíminn er 6 mánuðir. Forðast skal endurtekna frystingu og þíðingu. Sýnin eru flutt í kæli.
3. Kröfur um frystingu og þíðingu: Fljótleg frysting og þíðing, forðist endurtekna frystingu og þíðingu.
Aðgerð
Fyrir tilraunina skal athuga hvort úrkoma hafi myndast í lausninni og hvort hægt sé að endurleysa segulperlurnar.
1. Færið 200~300 μL af sýni í 1,5 ml skilvinduglas, bætið við 600 μL af lýsis- og bindingarlausn, 20 μL af próteinasa K og 20 μL af segulperlulausn í réttri röð og hrærið í vortex á miklum hraða í 30 sekúndur. Ræktið við 50°C í 5~7 mínútur. Ef hitastillirinn hefur ekki sveifluvirkni, hrærið í vortex þrisvar sinnum á meðan á ræktunartímanum stendur, í 15 sekúndur í hvert skipti.
2. Færið yfir í 1,5 ml segulstand til aðskilnaðar með segli þar til lausnin er tær og gegnsæ, og fargið henni síðan.
3. Bætið 700 μL af þvottalausn A út í, hrærið í vortex-blöndunni í 10 sekúndur til að brjóta upp segulperlurnar og færið síðan yfir á segulstand til aðskilnaðar með segli þar til lausnin er tær og fargið henni síðan.
4. Bætið 700 μL af þvottalausn B út í, hristið í 10 sekúndur til að brjóta upp segulperlurnar, færið yfir á segulstand til segulaðskilnaðar þar til lausnin er tær og fargið lausninni.
5. Bætið 700 μL af þvottalausn B aftur út í, hrærið í vortex-blöndunni í 10 sekúndur til að brjóta upp segulperlurnar, færið yfir á segulstand til aðskilnaðar með segli þar til lausnin er tær og fargið henni síðan.
6. Skiljið í stutta stund til að safna dropum á veggjum rörsins, færið á segulstand til að hreinsa og dragið í sig afgangsvökvann. Loftþurrkið í 3-5 mínútur.
Athugið: Leifar af etanóli hamla síðari ensímhvörfum, svo vertu viss um að etanólið gufi alveg upp við þurrkun. Ekki þurrka of lengi til að forðast að hafa áhrif á síðari útskilnaðaráhrif.
7. Bætið 40~100 μL af útskilnaðarlausn út í og hrærið í vortex-blöndunni á miklum hraða í 2~3 mínútur til að brjóta niður segulperlurnar. Látið standa við 60°C í 5 mínútur og hrærið síðan í vortex-blöndunni á miklum hraða í 60 sekúndur.
8. Notið skyndiskilvindu til að safna vökvanum af loki rörsins og flytjið hann yfir á segulgrindina þar til segulperlurnar hafa að fullu sogað saman. Færið síðan vökvann varlega yfir í nýtt skilvindurör til að fá kjarnsýrulausnina.
9. Kjarnsýrulausnina má geyma við -20°C til skammtímageymslu og -80°C til langtímageymslu.
Athugasemdir
1. Hinar ýmsu stuðpúðar í þessu setti innihalda gúanidínsölt. Vinsamlegast notið rannsóknarstofuslopp og einnota hanska til að tryggja öryggi ykkar og heilsu. Og meðhöndlið samkvæmt öryggisstöðlum. Látið ekki stuðpúðann komast í snertingu við húð, augu og slímhúðir. Ef það gerist skal skola strax með miklu vatni og leita læknis.
2. Ef lausnin fellur út þarf að baða hana í 30℃ vatni þar til botnfallið er alveg uppleyst áður en það er notað.
3. Ef segulperlublöndunni er frosin skal ekki nota hana.
4. Hinar ýmsu sótthreinsiefni í þessu setti innihalda gúanidínsölt. Notið ekki oxandi sótthreinsiefni eins og natríumhýpóklórít til að meðhöndla þau, annars losna eitraðar lofttegundir og þær verða að fara með sem læknisúrgang.
5. Segulperlur geta verið eftir við útskilnað. Forðist að anda að sér segulperlunum þegar sýni eru tekin upp.