Kit magnetico universale per DNA/RNA virale HYD521
Il kit universale magnetico per DNA/RNA virale è adatto per l'estrazione di acidi nucleici virali da sangue intero o fluidi corporei privi di cellule (come siero, plasma, liquido cerebrospinale, tamponi nasali/faringei, liquido di lavaggio alveolare, ecc.). Questo metodo utilizza la tecnologia di purificazione con microsfere magnetiche e non richiede l'estrazione con fenolo o cloroformio, sostanze tossiche, durante il processo di estrazione. È sicuro, non tossico e rapido. Il prodotto ottenuto può essere utilizzato direttamente in PCR, qPCR, sequenziamento di seconda generazione e altri esperimenti. Se utilizzato con strumenti di estrazione automatizzata con microsfere magnetiche, è possibile ottenere un'estrazione ad alta produttività di acidi nucleici.
Informazioni sul prodotto
| Ingegneria | 48T |
| Soluzione di lisi e legame | 33 ml |
| Sospensione di perline magnetiche | 1,1 mL |
| Tampone di lavaggio A | 40 ml |
| Tampone di lavaggio B | 80 ml |
| Soluzione di eluizione | 10 mL |
| Proteinasi K | 1,1 mL |
Sistemi di stoccaggio
La proteinasi K deve essere conservata a una temperatura compresa tra 2 e 8 °C, mentre gli altri ingredienti devono essere conservati a temperatura ambiente. La durata di conservazione è di 18 mesi.
Descrizione del campione
1. Tipi di campioni applicabili: sangue intero, siero, plasma, liquido cerebrospinale, tamponi nasali/faringei, liquido di lavaggio alveolare e altri campioni.
2. Conservazione e trasporto dei campioni: I campioni possono essere utilizzati per le analisi immediatamente oppure conservati a -70°C o a temperature inferiori. Il periodo di conservazione è di 6 mesi. È necessario evitare cicli ripetuti di congelamento e scongelamento. I campioni vengono trasportati secondo la catena del freddo.
3. Requisiti di congelamento e scongelamento: Congelamento e scongelamento rapidi, evitare cicli ripetuti di congelamento e scongelamento.
Operazione
Prima dell'esperimento, verificare se la soluzione presenta precipitati e se le microsfere magnetiche possono essere risospese.
1. Trasferire 200-300 μL di campione in una provetta da centrifuga da 1,5 mL, aggiungere in sequenza 600 μL di soluzione di lisi e legame, 20 μL di proteinasi K e 20 μL di sospensione di microsfere magnetiche e agitare con vortex ad alta velocità per 30 secondi. Incubare a 50℃ per 5-7 minuti. Se il termostato non dispone di funzione di oscillazione, agitare con vortex 3 volte durante il periodo di incubazione, ogni volta per 15 secondi.
2. Trasferire in un supporto magnetico da 1,5 mL per la separazione magnetica fino a ottenere una soluzione limpida e trasparente, quindi scartare la soluzione.
3. Aggiungere 700 μL di tampone di lavaggio A, agitare con un vortex per 10 secondi per rompere le microsfere magnetiche, quindi trasferire su un supporto magnetico per la separazione magnetica fino a quando la soluzione non risulta limpida e scartare la soluzione.
4. Aggiungere 700 μL di tampone di lavaggio B, agitare con vortex per 10 s per rompere le microsfere magnetiche, trasferire su un supporto magnetico per la separazione magnetica fino a quando la soluzione non risulta limpida e scartare la soluzione.
5. Aggiungere nuovamente 700 μL di tampone di lavaggio B, agitare con un vortex per 10 s per rompere le microsfere magnetiche, trasferire su un supporto magnetico per la separazione magnetica fino a quando la soluzione non risulta limpida e scartare la soluzione.
6. Centrifugare brevemente per raccogliere le goccioline sulla parete della provetta, trasferire su un supporto magnetico per la chiarificazione e assorbire il liquido residuo. Lasciare asciugare all'aria per 3-5 minuti.
Nota: i residui di etanolo inibiranno le successive reazioni enzimatiche, quindi assicurarsi che l'etanolo evapori completamente durante l'essiccazione. Non essiccare troppo a lungo per evitare di compromettere il successivo effetto di eluizione.
7. Aggiungere 40~100 μL di soluzione di eluizione, agitare con vortex ad alta velocità per 2~3 min per rompere le microsfere magnetiche. Incubare a 60℃ per 5 min, quindi agitare con vortex ad alta velocità per 60 s.
8. Centrifugare immediatamente per raccogliere il liquido dal tappo della provetta e trasferirlo sul supporto magnetico fino a completo assorbimento delle microsfere magnetiche. Quindi trasferire con cura il liquido in una nuova provetta da centrifuga per ottenere la soluzione di acido nucleico.
9. La soluzione di acido nucleico può essere conservata a -20 °C per la conservazione a breve termine e a -80 °C per la conservazione a lungo termine.
Note
1. I vari tamponi contenuti in questo kit contengono sali di guanidina. Per la vostra sicurezza e salute, indossate un camice da laboratorio e guanti monouso. Maneggiate il prodotto seguendo le precauzioni di sicurezza standard. Evitate il contatto del tampone con la pelle, gli occhi e le mucose. In caso di contatto, lavate immediatamente con abbondante acqua e consultate un medico.
2. Se la soluzione precipita, prima dell'uso è necessario immergerla in acqua a 30°C fino a completo scioglimento del precipitato.
3. Se la sospensione di perline magnetiche è congelata, non utilizzarla.
4. Le varie soluzioni tampone contenute in questo kit contengono sali di guanidina. Non utilizzare disinfettanti ossidanti come l'ipoclorito di sodio per trattarle, altrimenti si rilasceranno gas tossici e dovranno essere smaltite come rifiuti sanitari.
5. Durante l'eluizione potrebbero essere presenti microsfere magnetiche residue. Cercare di evitare di inalare le microsfere magnetiche durante l'aspirazione dei campioni.