მაგნიტური უნივერსალური ვირუსული დნმ/რნმ ნაკრები HYD521
მაგნიტური უნივერსალური ვირუსული დნმ/რნმ ნაკრები გამოდგება ვირუსული ნუკლეინის მჟავის ექსტრაქციისთვის მთელი სისხლიდან ან უჯრედებისგან თავისუფალი ორგანიზმის სითხეებიდან (როგორიცაა შრატი, პლაზმა, ცერებროსპინალური სითხე, ცხვირის/ხახის ნაცხი, ალვეოლური ლავაჟის სითხე და ა.შ.). ეს მეთოდი იყენებს მაგნიტური მძივების გაწმენდის ტექნოლოგიას და ექსტრაქციის პროცესში არ არის საჭირო ტოქსიკური ფენოლ-ქლოროფორმის ექსტრაქცია. ის უსაფრთხო, არატოქსიკური და სწრაფია. მიღებული პროდუქტის პირდაპირ გამოყენება შესაძლებელია PCR-ში, qPCR-ში, მეორე თაობის სეკვენირებასა და სხვა ექსპერიმენტებში. მაგნიტური მძივების ავტომატური ექსტრაქციის ინსტრუმენტებთან გამოყენებისას შესაძლებელია ნუკლეინის მჟავების მაღალი გამტარუნარიანობის ექსტრაქციის მიღწევა.
პროდუქტის ინფორმაცია
| კომპონენტები | 48T |
| ლიზისი და შეკავშირების ხსნარი | 33 მლ |
| მაგნიტური მძივების სუსპენზია | 1.1 მლ |
| სარეცხი ბუფერი A | 40 მლ |
| სარეცხი ბუფერი B | 80 მლ |
| ელუირების ხსნარი | 10 მლ |
| პროტეინაზა K | 1.1 მლ |
შენახვის პირობები
პროტეინაზა K უნდა ინახებოდეს 2~8℃ ტემპერატურაზე, ხოლო სხვა ინგრედიენტები - ოთახის ტემპერატურაზე. ვარგისიანობის ვადაა 18 თვე.
ნიმუშის აღწერა
1. შესაბამისი ნიმუშების ტიპები: მთლიანი სისხლი, შრატი, პლაზმა, ცერებროსპინალური სითხე, ცხვირის/ხახის ნაცხი, ალვეოლური ლავაჟის სითხე და სხვა ნიმუშები.
2. ნიმუშების შენახვა და ტრანსპორტირება: ნიმუშების გამოყენება შესაძლებელია ტესტირებისთვის დაუყოვნებლივ ან შენახვა -70℃ ან უფრო დაბალ ტემპერატურაზე. შენახვის ვადაა 6 თვე. თავიდან უნდა იქნას აცილებული განმეორებითი გაყინვა და გალღობა. ნიმუშების ტრანსპორტირება ხდება ცივი ჯაჭვის მეშვეობით.
3. გაყინვა-დათბობის მოთხოვნები: სწრაფი გაყინვა და დათბობა, განმეორებითი გაყინვისა და დათბობის თავიდან აცილება.
ოპერაცია
ექსპერიმენტის დაწყებამდე შეამოწმეთ, არის თუ არა ხსნარში ნალექი და შესაძლებელია თუ არა მაგნიტური მძივების ხელახლა სუსპენზირება.
1. 200~300 μL ნიმუში გადაიტანეთ 1.5 მლ ცენტრიფუგის მილში, თანმიმდევრობით დაამატეთ 600 μL ლიზისისა და შემაკავშირებელი ხსნარი, 20 μL პროტეინაზა K და 20 μL მაგნიტური მძივების სუსპენზია და ურიეთ მაღალი სიჩქარით 30 წამის განმავლობაში. ინკუბაცია მოახდინეთ 50℃ ტემპერატურაზე 5~7 წუთის განმავლობაში. თუ თერმოსტატს არ აქვს რხევის ფუნქცია, ინკუბაციის პერიოდში 3-ჯერ ურიეთ, ყოველ ჯერზე 15 წამის განმავლობაში.
2. გადაიტანეთ 1.5 მლ-იან მაგნიტურ სადგამზე მაგნიტური გამოყოფისთვის, სანამ ხსნარი გამჭვირვალე და გამჭვირვალე არ გახდება და გადააგდეთ.
3. დაამატეთ 700 μL გამრეცხი ბუფერი A, ურიეთ 10 წამის განმავლობაში მაგნიტური მძივების დასაშლელად, შემდეგ გადაიტანეთ მაგნიტურ სადგამზე მაგნიტური გამოყოფისთვის, სანამ ხსნარი გამჭვირვალე არ გახდება და გადააგდეთ ხსნარი.
4. დაამატეთ 700 μL გამრეცხი ბუფერი B, ურიეთ 10 წამის განმავლობაში მაგნიტური მძივების დასაშლელად, გადაიტანეთ მაგნიტურ სადგამზე მაგნიტური გამოყოფისთვის, სანამ ხსნარი გამჭვირვალე არ გახდება და გადააგდეთ ხსნარი.
5. კვლავ დაამატეთ 700 μL გამრეცხი ბუფერი B, ურიეთ 10 წამის განმავლობაში მაგნიტური მძივების დასაშლელად, გადაიტანეთ მაგნიტურ სადგამზე მაგნიტური გამოყოფისთვის, სანამ ხსნარი გამჭვირვალე არ გახდება და გადააგდეთ ხსნარი.
6. მილის კედელზე წვეთების შესაგროვებლად მცირე ხნით ცენტრიფუგირება მოახდინეთ, გასასუფთავებლად მაგნიტურ სადგამზე გადაიტანეთ და ნარჩენი სითხე შეიწოვეთ. გააშრეთ ჰაერზე 3-5 წუთის განმავლობაში.
შენიშვნა: ეთანოლის ნაშთი შემდგომ ფერმენტულ რეაქციებს შეაფერხებს, ამიტომ დარწმუნდით, რომ ეთანოლი გაშრობისას მთლიანად აორთქლდება. არ გააშროთ დიდხანს, რათა თავიდან აიცილოთ შემდგომი ელუირების ეფექტის გავლენა.
7. დაამატეთ 40~100 μL ელუციური ხსნარი, მოურიეთ მაღალი სიჩქარით 2~3 წუთის განმავლობაში მაგნიტური მძივების დასაშლელად. ინკუბაცია ჩაატარეთ 60℃ ტემპერატურაზე 5 წუთის განმავლობაში, შემდეგ მოურიეთ მაღალი სიჩქარით 60 წამის განმავლობაში.
8. მომენტალური ცენტრიფუგით შეაგროვეთ სითხე მილის თავსახურიდან და გადაიტანეთ მაგნიტურ სადგამზე მანამ, სანამ მაგნიტური მძივები სრულად არ შეიწოვება. შემდეგ ფრთხილად გადაიტანეთ სითხე ახალ ცენტრიფუგის მილში ნუკლეინის მჟავას ხსნარის მისაღებად.
9. ნუკლეინის მჟავას ხსნარის შენახვა შესაძლებელია -20°C-ზე ხანმოკლე შენახვისთვის და -80°C-ზე ხანგრძლივი შენახვისთვის.
შენიშვნები
1. ამ ნაკრებში შემავალი სხვადასხვა ბუფერები შეიცავს გუანიდინის მარილებს. თქვენი უსაფრთხოებისა და ჯანმრთელობისთვის, გთხოვთ, ატაროთ ლაბორატორიული ხალათი და ერთჯერადი ხელთათმანები. და გამოიყენეთ უსაფრთხოების სტანდარტული ზომების დაცვით. არ დაუშვათ ბუფერის კანთან, თვალებთან და ლორწოვან გარსებთან კონტაქტი. თუ ეს მაინც მოხდა, დაუყოვნებლივ ჩამოიბანეთ დიდი რაოდენობით წყლით და მიმართეთ ექიმს.
2. თუ ხსნარი დაილექება, გამოყენებამდე ის 30°C ტემპერატურაზე წყალში უნდა დაიბანოთ, სანამ ნალექი სრულად არ გაიხსნება.
3. თუ მაგნიტური მძივების სუსპენზია გაყინულია, არ გამოიყენოთ იგი.
4. ამ ნაკრებში შემავალი სხვადასხვა ბუფერები შეიცავს გუანიდინის მარილებს. მათ დასამუშავებლად არ გამოიყენოთ დამჟანგავი სადეზინფექციო საშუალებები, როგორიცაა ნატრიუმის ჰიპოქლორიტი, წინააღმდეგ შემთხვევაში გამოიყოფა ტოქსიკური აირები და ისინი სამედიცინო ნარჩენებად უნდა დამუშავდეს.
5. ელუაციის დროს შესაძლოა მაგნიტური მძივები დარჩეს. ნიმუშების ასპირაციისას ეცადეთ, თავი აარიდოთ მაგნიტური მძივების შესუნთქვას.


