HYD521 магнитті әмбебап вирустық ДНҚ/РНҚ жинағы
Магнитті әмбебап вирустық ДНҚ/РНҚ жинағы қаннан немесе жасушасыз дене сұйықтықтарынан (мысалы, сарысу, плазма, жұлын-ми сұйықтығы, мұрын/жұтқыншақ жағындылары, альвеолярлық жуғыш сұйықтық және т.б.) вирустық нуклеин қышқылын алуға жарамды. Бұл әдіс магнитті моншақтарды тазарту технологиясын қолданады және экстракция процесінде улы фенолхлороформ экстракциясы қажет емес. Ол қауіпсіз, улы емес және жылдам. Алынған өнімді ПТР, qPCR, екінші буын секвенирлеу және басқа да тәжірибелерде тікелей қолдануға болады. Магнитті моншақтарды автоматтандырылған экстракциялау құралдарымен қолданған кезде нуклеин қышқылдарының жоғары өнімді экстракциясына қол жеткізуге болады.
Өнім туралы ақпарат
| Компоненттер | 48T |
| Лизис және байланыстырушы ерітінді | 33 мл |
| Магниттік моншақ суспензиясы | 1,1 мл |
| Жуу буфері A | 40 мл |
| Жуу буфері B | 80 мл |
| Элюция ерітіндісі | 10 мл |
| Протеиназа К | 1,1 мл |
Сақтау шарттары
Протеиназа К 2-8°C температурада, ал басқа ингредиенттер бөлме температурасында сақталуы керек. Жарамдылық мерзімі - 18 ай.
Үлгі сипаттамасы
1. Қолданылатын үлгі түрлері: тұтас қан, сарысу, плазма, жұлын-ми сұйықтығы, мұрын/жұтқыншақ жағындылары, альвеолярлық жуғыш сұйықтық және басқа үлгілер.
2. Үлгілерді сақтау және тасымалдау: Үлгілерді дереу сынау үшін пайдалануға немесе сынау үшін -70℃ немесе одан төмен температурада сақтауға болады. Сақтау мерзімі - 6 ай. Қайталап мұздату және ерітуден аулақ болу керек. Үлгілер суық тізбек арқылы тасымалданады.
3. Мұздату-еріту талаптары: тез мұздату және еріту, қайта-қайта мұздату мен ерітуден аулақ болыңыз.
Операция
Тәжірибе алдында ерітіндіде тұнба бар-жоғын және магниттік моншақтарды қайта ілуге болатынын тексеріңіз.
1. 200-300 мкл үлгіні 1,5 мл центрифуга түтігіне салыңыз, 600 мкл лизис және байланыстырушы ерітіндіні, 20 мкл протеиназа К және 20 мкл магниттік моншақ суспензиясын тізбектей қосып, жоғары жылдамдықпен 30 секунд шайқаңыз. 50°C температурада 5-7 минут инкубациялаңыз. Егер термостаттың тербеліс функциясы болмаса, инкубация кезеңінде 3 рет, әрқайсысын 15 секундтан шайқаңыз.
2. Ерітінді мөлдір және мөлдір болғанша магниттік бөлу үшін 1,5 мл магниттік стендке салыңыз және ерітіндіні төгіп тастаңыз.
3. 700 мкл жуу буфері A қосыңыз, магнитті түйіршіктерді ыдырату үшін 10 секунд шайқаңыз, содан кейін ерітінді мөлдір болғанша магнитті бөлу үшін магнитті стендке салыңыз және ерітіндіні тастаңыз.
4. 700 мкл жуу буферін B қосыңыз, магнитті моншақтарды ыдырату үшін 10 секунд араластырыңыз, ерітінді мөлдір болғанша магнитті бөлу үшін магнитті стендке салыңыз және ерітіндіні төгіп тастаңыз.
5. 700 мкл жуу буферін B қайтадан қосыңыз, магниттік моншақтарды ыдырату үшін 10 секунд шайқаңыз, ерітінді мөлдір болғанша магниттік бөлу үшін магниттік стендке ауыстырыңыз және ерітіндіні төгіп тастаңыз.
6. Түтік қабырғасындағы тамшыларды жинау үшін қысқа уақытқа центрифугалаңыз, мөлдірлеу үшін магнитті тірекке салыңыз және қалған сұйықтықты сіңіріңіз. 3-5 минут бойы ауада кептіріңіз.
Ескертпе: Этанол қалдығы кейінгі ферменттік реакцияларды тежейді, сондықтан кептірген кезде этанолдың толығымен булануына көз жеткізіңіз. Кейінгі элюция әсеріне әсер етпеу үшін тым ұзақ кептірмеңіз.
7. 40-100 мкл элюция ерітіндісін қосып, магниттік моншақтарды бөлшектеу үшін жоғары жылдамдықпен 2-3 минут шайқаңыз. 60°C температурада 5 минут инкубациялаңыз, содан кейін жоғары жылдамдықпен 60 секунд шайқаңыз.
8. Түтік қақпағынан сұйықтықты жинап, магниттік моншақтар толығымен адсорбцияланғанша магниттік сөреге ауыстыру үшін лезде центрифуга жасаңыз. Содан кейін нуклеин қышқылының ерітіндісін алу үшін сұйықтықты жаңа центрифуга түтігіне абайлап ауыстырыңыз.
9. Нуклеин қышқылының ерітіндісін қысқа мерзімді сақтау үшін -20°C және ұзақ мерзімді сақтау үшін -80°C температурада сақтауға болады.
Ескертпелер
1. Бұл жинақтағы әртүрлі буферлерде гуанидин тұздары бар. Қауіпсіздігіңіз бен денсаулығыңыз үшін зертханалық халат пен бір рет қолданылатын қолғап киіңіз. Қауіпсіздік стандартты сақтық шараларына сәйкес қолданыңыз. Буфердің теріге, көзге және шырышты қабықтарға тиюіне жол бермеңіз. Егер бұл орын алса, дереу көп мөлшерде сумен жуып, медициналық көмекке жүгініңіз.
2. Егер ерітінді тұнбаға түссе, қолданар алдында тұнба толығымен ерігенше оны 30°C суда жуу керек.
3. Егер магнитті моншақ суспензиясы қатып қалған болса, оны пайдаланбаңыз.
4. Бұл жинақтағы әртүрлі буферлерде гуанидин тұздары бар. Оларды өңдеу үшін натрий гипохлориті сияқты тотықтырғыш дезинфекциялық заттарды пайдаланбаңыз, әйтпесе улы газдар бөлінеді және оларды медициналық қалдықтар ретінде өңдеу керек.
5. Элюция кезінде магниттік моншақтар қалуы мүмкін. Үлгілерді сорып алғанда магниттік моншақтармен дем алмауға тырысыңыз.